AxSYM plus全自动发光免疫分析仪的应用评价

    美国雅培公司生产的AxSYM plus全自动发光免疫分析仪集微粒子发光技术、离子捕捉技术和荧光偏振发光技术于一体，提高了试剂的分析能力，具有较高的灵敏度、特异性和稳定性。现以AFP、T3和TSH为例，对我院使用的AxSYM plus全自动发光免疫分析仪的性能给予评价。

    1  材料与方法

    11  仪器与试剂  AxSYM plus全自动化学免疫分析仪由美国雅培公司生产；AFP、T3和TSH试剂药盒及定标液均由美国雅培公司提供。

    12  材料

    121  样本血清  为我科收集的病人混合血清，分为低、中、高3种，少量分装，-20℃冷冻保存。

    122  正常血清  为我科收集的正常人新鲜混合血清。

    123  低、中、高质控品  由美国雅培公司提供。

    13  实验方法

    131  准确度  采用回收试验。在500μl正常血清内加入AFP低、中、高质控液50μl，制成3个待测样品进行回收试验。见表1。

    132  精密度  采用重复性试验，取正常新鲜混合血清分别对AFP、T3和TSH连续检测10次，计算批内x±s及CV值。取定值质控每日检测一次，连续检测10天，计算批间x±s及CV值。见表2。表1  AFP回收试验结果  (略) 表2  重复性试验结果

    133  灵敏度  采用线性试验。分别以AFP、T3和TSH多个高浓度病人血清充分混合重复测定3次作为标准值，再以该血清用稀释液作不同比例稀释，取含高、中、低不同浓度5管上机测定（各测3次, 取平均值），进行测定值与预期值之间的比较。 见表3。

    134  特异性  采用交叉污染(干扰)试验，以TSH高值（H）和T3低值（L）两个浓度样品，先对TSH高（H）浓度样品测定后，再立即测定T3低（L）浓度样品，分别测量4次，计算TSH均值（H），用公式（T3高－T3低）/H×100计算T3对TSH的交叉污染率。见表4。表3  灵敏度线性试验结果表4  TSH对T3的交叉污染试验结果

    2  结果

    21  准确度测试中回收试验的测试结果  由表1可知，低、中、高3个样品的回收率分别是972%、979%和1022%，结果表明，回收试验符合实验方法选择条件的标准，说明了该设备的准确度高。

    22  精密度测试中的重复性试验结果  由表2可知，测定结果的批内变异小于4%，批间变异小于5%，说明了该设备具有较高的精密度。

    23  灵敏度的线性试验结果  由表3可知，该设备所测结果的线性良好。

    24  特异性测试T3对TSH的交叉污染（干扰）试验结果  该仪器在加入样品和试剂前，探针自动进行冲洗，且样品杯和反应杯均为一次性使用，有效地解决了交叉污染问题。

    3  讨论

    　　美国雅培AxSYM plus全自动发光免疫分析仪集微粒子发光技术、离子捕捉技术和荧光偏振发光技术于一体。

    31  微粒子酶免分析法(MEIA)  主要用于测定蛋白质、病毒抗原等大分子物质。抗原／抗体包被的微粒子：微粒子的直径只有05u,表面多孔，从而大大增加了反应的表面积，提高了反应的灵敏度，缩短了反应的时间。微粒子是由多孔高分子粒子制成，具有很好的亲水性，且比重与水相仿，悬浮性极佳。微粒子可与玻璃纤维不可逆结合，从而提高了反应的特异性。酶标抗体采用碱性磷酸酶作为标记物。基质液采用极稳定的MUP(4-Methylumbelliferyl Phosphate),  4-甲基磷酸伞型酮。通过测定荧光发光的强度来检测被测物的浓度，极微的荧光就能被特制的感光结构所感应到，具有极好的灵敏度和稳定性，并采用测初速度法代替终点法，每秒8次的读数大大提高了结果的准确性和缩短了反应的时间。

    32  荧光偏振免疫分析法（FPIA法）  主要用于测定药物，激素等小分子物质。根据竞争结合法的原理，利用被测物质中被测对象所具有的偏振光性进行测量。

    分子量小的物质由于在溶液中进行活泼的旋转运动，虽然吸收了一定方向的激发偏振光，但是不能激发出另一偏振光，即失去偏振性。分子量大的物质，因为旋转运动受抑制，当它受到一定方向振动的光照后就能激发出另一波长的按一定方向振动的光来。

    　　荧光标记抗原由于分子量小，失去大部分偏振光性，所以它的偏振光度就小；另一方面，当抗原与抗体大分子的物质结合后，分子量变大，所以荧光偏振光度就变大。

    　　标本中抗原与一定量的标记抗原与抗体进行竞争反应，样本中的抗原越多，与抗体结合的标记抗原就越少，从而激发的荧光偏振光度也就越少。

    33  离子捕捉免疫分析法（ICIA）  主要用于GHb，叶酸等这类项目的测定。在反应孔中的玻璃纤维预先包被了高分子的四铵复合物，从而使纤维表面带正电，得以能够捕捉带负电的反应复合物，通过静电正负结合的原理，使反应复合物吸附在纤维上。

    　  反应的复合物是通过抗原抗体相反应的原理，并联以荧光标记物，这个复合物通过连接带负电的多聚阴离子复合物，吸附到带正电的纤维表面，经过一系列彻底清洗等步骤后，测定荧光强度变化率，从而决定被测物质的浓度。

    AxSYM plus全自动发光免疫分析仪经测试表明其准确度、精密度、灵敏度、特异性均能充分满足临床检验和科研试验的需求，同时克服了RIA法试剂有效期短和辐射污染、ELISA法易受温度酸碱度变化的影响及其前带和倒钩现象等缺点。该仪器对于高浓度超线性范围的标本具有自动稀释重检功能和急诊检测功能，能准确、快速地报告结果，更加方便了临床诊断。

   作者单位：262500 山东青州，潍坊医学院附属青州医院

　  (编辑：若  木)