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【摘要】 目的 建立十全大补酒中阿魏酸的含量测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法，C18柱(DiamonsilTM4.6mm×200mm)；流动相为乙腈-水-冰醋酸（12：88：1），检测波长为323nm，流速1.00ml/min，柱温30℃。结果 此方法阿魏酸在0.1197～0.9574μg范围内呈良好的线性关系：r=0.99998，平均回收率100.2%，RSD=0.3%（n=9）。结论 所建立的方法简便、快速、准确，可用于十全大补酒的质量控制。
【关键词】 十全大补酒 阿魏酸；HPLC法
Determine of ferulic acid in Shiquandabu vinum by HPLC
LU Qing-hua，LI Hong-yong，LUO Chen-qu.Loudi Institute for Drug Control, Loudi 417000,China
【Abstract】 Objective To establish a HPLC method for determination of ferulic acid in Shiquandabu vinum.Methods A C18 column (DiamonsilTM4.6mm×200mm),column temperature of 30℃,a mobile phase composed of acetonitrile-water-glacial acetic acid(12:88:1) were adopted. Wave length: 323nm,flow rate: 1.00ml/min. Results The linear range was at 0.1197 ～0.9574μg, r= 0.99998.The recovery of ferulic acid was100.2% with RSD=0.3%(n=9).Conclusion The determination method is simple and rapid by HPLC , ferulic acid in this product can be controlled.
【Key words】 shiquandabu vinum; ferulic acid; HPLC
十全大补酒为《卫生部药品标准中药成方制剂》第四册收载的品种［1］，由党参、川芎、当归等10味中药组成，用于气血两虚，面色苍白，气短心悸，头晕自汗，体倦乏力，月经量多诸症。川芎、当归为方中佐助药，均含有阿魏酸。本品原标准中仅有常规检查项，现采用HPLC法对阿魏酸进行定量分析，获得较满意结果。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪，Waters 1525HPLC Pump，Waters 2487 Detector，Waters 717Plus Autosamper，1500恒温箱，Empower色谱工作站。
1.2 试剂 阿魏酸对照品购自中国药品生物制品检定所（批号：110773-200611）,水为Ⅰ级纯化水，乙腈（HPLC用），其他试剂为分析纯。样品购自江西心正药业有限责任公司（批号：20070104；20050402）。
2 方法
2.1 色谱条件 C18柱(DiamonsilTM 5μ4.6mm×200mm)，流动相：乙腈-水-冰醋酸（12：88：1），流速： 1.00ml/min，柱温30℃，检测波长323nm。
2.2 对照品储备液的配制 精密称取五氧化二磷减压干燥24h的阿魏酸对照品14.96mg，加50%甲醇溶解并稀释至浓度为0.02394mg/ml的储备液备用。
2.3 供试品溶液的配制 取本品10.00ml，加水10ml稀释，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取4次（20ml、20ml、20ml、10ml）合并正丁醇液，蒸干，残渣加50%甲醇溶解并定量转移至25ml量瓶中，并稀释至刻度。
3 结果
3.1 系统适应性试验 在上述色谱条件下测定,结果表明,理论板数以阿魏酸峰计算为9388,阴性样品对照测定无扰。色谱图见图1。
3.2 线性关系的考察 取上述储备液，分别进样5.0μl、10.0μl、20.0μl、30.0μl、40.0μl，以峰面积平均值为纵坐标，进样量为横坐标，计算回归方程，得Y=﹣2.252×102+1.678×105X r=0.99998 阿魏酸进样量在0.1197～0.9574μg范围内呈良好线性关系。
图1 色谱图
3.3 精密度试验 精密吸取对照品储备液，进样20μl，连续进样5次，记录峰面积，RSD=0.8%。
3.4 重复性试验 取同一批号（20070104）样品，分别按2.3项下的方法制备，测定其阿魏酸平均含量为62.00μg/ml，RSD=0.7%。
3.5 稳定性试验 取同一批号（20070104）样品，按样品溶液制备法制备，在0h、3h、6h、9h、12h测定一次，记录峰面积，RSD=0.4%。
3.6 加样回收率试验 精密量取十全大补酒（20070104）5ml，共9份，分别精密加对照品溶液(0.2992mg/ml),一定量，挥干。按2.3项下的方法制备,再按上述色谱法条件测定。计算加样回收率。结果见表1。 表1 加样回收率试验
3.7 测定法 取两批样品,按2.3项下方法制备供试品溶液,依法测定。结果见表2。 表2 样品含量测定结果
4 讨论
曾采用参考文献［2］中的提取方法（取本品10.00ml蒸干，残渣加稀乙醇50ml置容量瓶中，超声30min），进行试验，结果表明：杂质峰太多，难以分离，故采用正丁醇提取。
在试验过程中，曾采用甲醇-水(20：80)、甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液（10：10：89）［3］等多种流动相，色谱峰分离均不理想，而未被采用。经实验摸索，确定乙腈-水-冰醋酸（12：88：1）分离效果好，tR及峰形达到理想的效果，而被采用。
【参考文献】
1 卫生部药品标准中药成方制剂，第四册，1991，1
2 国家药品管理监督局.国家中成药标准汇编（中成药地方标准上升国家标准部分）.内科·气血津液分册，2002，201
3 张汉洁，吴建兵,丘明丰，等.HPLC测定舒胸滴丸中阿魏酸的含量.中国中药杂志,2007,32(1):78.
作者单位：417000 湖南娄底，娄底市药品检验所