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【摘要】 目的 建立鼻舒适片中芍药苷的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定芍药苷的含量。选用ODS色谱柱，芍药苷以0.025mol/ L磷酸二氢钾溶液－乙腈（89：11）为流动相；检测波长为230nm。结果 芍药苷在0.07976～3.988μg范围内线性关系良好，γ=0.9999，平均回收率100.2%，RSD为2.7%。结论 鉴别方法专属性强，定量方法简便、准确，本含量测定方法可用于鼻舒适片的定量检测。
【关键词】 鼻舒适片；芍药苷；高效液相色谱法
【Abstract】 Objective To establish the content determination of Paeoniflorin in Bishushi tablet.Methods HPLC was performed to determine on ODS column,the mobile phase consisting of 0.025mol/L potassium dihydrogen phosphate and acetonitrile（89:11）,and its detection wavelength at 230nm.Results Paeoniflorin showed a good linear relationship in the a range of 0.07976～3.988μg,γ = 0.9999. The average recovery was 100.2％ and RSD was 2.7％.Conclusion The established method are accurate,reproducible and can be used for the quantitation control of Bishushi tablet.
【Key words】 Bishushi tablet；Paeoniflorin；HPLC
鼻舒适片由苍耳子、野菊花、墨旱莲、防风、白芍等十一味药物组成的中药制剂，清热消炎，通窍。用于治疗慢性鼻炎引起的喷嚏、流涕、鼻塞、头痛，过敏性鼻炎，慢性鼻窦炎。鼻舒适片收载于《卫生部药品标准中药成方制剂》第七册。原标准项下，没有定量检测项目［1］。为了有效控制本品的质量，进行了定量研究，制定了芍药苷的高效液相色谱定量的方法，该方法专属性好，重现性好，能有效控制产品的质量。现报告如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪，Agilent WVD检测器；Agilent DAD检测器（上海安捷伦公司）；依利特 Hypersil C18（10/120/7100），5μm，4.6mm×250mm。
1.2 试药 芍药苷化学对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110736-200422，供含量测定用），甲醇、乙腈（色谱纯，TEDIA company INC.，USA），磷酸二氢钾（分析纯），水（重蒸馏水）。
2 方法与结果
2.1 色谱分析条件 依利特 Hypersil C18（5μm，4.6mm×250mm）色谱柱；以0.025mol/ L 磷酸二氢钾溶液－乙腈（89: 11）为流动相；检测波长为230nm； 流速为1.0ml/min。在此条件下芍药苷与其他组分达到基线分离，分离度大于1.5。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥器中干燥36h的芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备 取鼻舒适片10片，除去包衣，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理45min，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.4 阴性对照品溶液制备 取自制不含白芍的处方量制剂样品，按供试品制备方法，制成阴性对照溶液。
2.5 准确度试验 精密吸取0.2714mg/ml的芍药苷对照品1、2、3ml各3份，分别加入50ml锥形瓶中，水浴蒸干。精密称取0.25g 供试品（B6A003，含量1.037mg/g，平均片重0.287g）加入上述锥形瓶中，按质量标准方法处理，吸取10μl注入液相色谱仪中进行含量测定，计算回收率，结果见表1。
2.6 重复性试验 取供试品溶液溶液，按含量测定方法重复测定6次。芍药苷峰面积RSD为1.3%。
2.7 专属性试验 制备对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液溶液，精密吸取各10μl，注入液相色谱仪，照上述色谱条件试验，记录色谱图。结果供试品色谱图中有与芍药苷标准品保留时间相同的吸收峰，阴性对照溶液未检出芍药苷峰，表明用本方法测定芍药苷含量无阴性干扰，专属性强。见图1。 表1 供试品准确度试验
2.8 线性范围考察 精密称取经置五氧化二磷干燥器中干燥36h的芍药苷对照品8.0mg，置20m1容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，作为贮备液，分别取贮备液1ml置2、10、15、25、50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，分别取各稀释液及贮备液各进样10μl，按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积积分值为纵坐标，芍药苷含量为横坐标，绘制标准曲线，进行回归分析。得回归方程Y = 1262.5X + 21.655，r=0.9999,表明芍药苷在0.07976～3.988μg范围内线性关系良好。
2.9 稳定性试验 分别在样品制备后0、3、6、9、12h测定。结果表明，芍药苷的RSD为1.73%。
2.10 含量测定 取供试品，依标准草案的含量方法测定含量，结果见表2。
A.芍药苷对照品；B.鼻舒适片；C.缺白芍的阴性对照谱表2 鼻舒适片样品测定
3 讨论
3.1 提取方法考察 用甲醇为提取溶剂，对回流法和超声法处理30min比较，结果表明，超声法处理提取效率较高，故选用超声法处理。
3.2 超声时间考察 用甲醇为提取溶剂，对不同回流时间进行考察，结果提示，超声60min提取最大，但是与超声45min的结果接近，为节约提取时间，故确立超声时间为45min。
3.3 流动相系统考察 本实验对芍药苷进行HPLC分析采用的流动相系统组成做了比较，甲醇－水（25：75）［2］，0.1%磷酸-乙腈（82:18）［3］，0.025mol/ L磷酸二氢钾溶液－乙腈（80:20）［4］，0.025mol/ L磷酸二氢钾溶液－乙腈（89:11）等流动相进样考察，结果发现以0.025mol/ L 磷酸二氢钾溶液－乙腈（89:11）分离效果最好，重现性好。
【参考文献】
1 中华人民共和国卫生部标准.中药成方制剂，第五册，1993，65.
2 盛蓉，宋英，郑琰,等.HPLC测定止血消瘀胶囊中芍药苷的含量.中国中医药科技,2005，12（1）：38-39.
3 孙景卫.RP-HPLC法测定鹿茸生新胶囊中芍药苷的含量.山东中医杂志,2005，24（7）：433.
4 和健，王建国，穆丽华,等.HPLC测定迪可颗粒中芍药苷和粉防己碱的含量. 中成药,2005，27（1）：42.
作者单位：510515 广东广州，广州白云山和记黄埔中药有限公司