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【摘要】 目的 通过检测前列腺液中枸橼酸（EPS-citrate）水平，探讨其在Ⅲ型前列腺炎诊断、鉴别诊断的临床意义。方法 利用高效液相色谱仪（HPLC）定量法检测30例ⅢA、30例ⅢB型前列腺炎患者前列腺液中citrate水平。结果 ⅢA型EPS-citrate水平在1.39～5.12mg/ml之间，平均3.43±0.81mg/ml；ⅢB型EPS-citrate在2.26～6.31mg/ml之间，平均4.42±0.83mg/ml，ⅢB组明显高于ⅢA组，统计学上差异有显著性。结论 HPLC法测定EPS-citrate是一种敏感可靠的方法，EPS-citrate定量检测对ⅢA、ⅢB型前列腺炎的诊断、鉴别诊断具有重要的临床意义。
【关键词】 Ⅲ型前列腺炎；枸橼酸测定
Clinical significance of expressed prostatic secretion citrate determination in Ⅲ prostatitis
PENG Cheng，XU Zhi-shun， CHEN Jun. Department of Urology, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012，China
【Abstract】 Objective To study the clinical significance of expressed prostatic secretion citrate （EPS-citrate） determination in the diagnosis and differential diagnosis of Ⅲ prostatitis.Methods 30 patients of ⅢA prostatitis served as control, 30 patients of ⅢB prostatitis and 15 normal control men without any prostatic diseases were included. All the ⅢA and ⅢB patients have not received any management. The EPS-citrate was determined by High performance liquid chromatography （HPLC）.Results EPS-citrate was 6.73 ～10.85 mg/ml, 1.39～5.12 mg/ml and 2.26～6.31 mg/ml in the normal control group, ⅢA group and ⅢB group, respectively. The corresponding mean value was 8.73±1.28 mg/ml, 3.42±0.91mg/ml and 4.32±0.90 mg/ml, respectively. The EPS-citrate mean value of the normal control group was significantly higher than that of ⅢA and ⅢB groups（P<0.001）, and the EPS-citrate mean value of the IIIB group were higher than that of ⅢA group（P<0.001）.Conclusion The EPS-citrate determined by HPLC is a sensitive,reliable method, and the quantification of EPS-citrate is of significance in diagnosis,differential diagnosis of ⅢA and ⅢB prostatitis.
【Key words】 prostatitis;citrate; HPLC
前列腺液枸橼酸（EPS-citrate）是反映前列腺分泌功能的重要指标,由于在前列腺炎患者中ⅢB型大约占1/3［1］， ⅢA占更为多数，炎症可致其分泌的EPS-citrate下降［2］。本研究通过测定ⅢA、ⅢB型前列腺炎患者EPS-citrate水平，采用统计学方法分析，以探讨其在ⅢA、ⅢB型前列腺炎诊断、鉴别诊断的临床意义。
1 材料与方法
1.1 临床资料 患者入选条件：（1）年龄在20～40岁之间；（2）病程在3个月以上；（3）为排除治疗的影响，患者均初次就诊，既往未接受过相关治疗；（4）尿常规及尿培养结果排除尿路感染；（5）前列腺液培养无细菌生长；（6）症状典型，以疼痛为主；（7）卵磷脂小体均有不同程度的减少。（8）除满足上述条件外，ⅢA型患者前列腺液白细胞（EPS-WBC）≥10/400倍视野，ⅢB型患者EPS-WBC<10/400倍视野［3］。另外，选择15例健康男性前列腺前列腺液为正常对照，所有正常对照无前列腺炎相关症状,尿、前列腺液常规检查及细菌培养均正常, 前列腺B超检查正常。三组平均年龄差异无显著性（P>0.05）, 慢性前列腺炎症状评分ⅢA和ⅢB组比较差异无显著性（P>0.05）。三组临床特点详见表1。 表1 ⅢA、ⅢB、正常对照组临床特点
1.2 方法 所有患者及正常对照组成员前列腺按摩前禁性生活5天，按摩前列腺前留取尿液做常规检查并送细菌培养。尿道按摩后第一滴前列腺液弃之不用，之后留取一滴前列腺液做常规检查和细菌培养，400倍显微镜下计数EPS-WBC。剩余前列腺液以载玻片收集，1ml规格的去针头皮试针（可精确至0.01ml）定量收集后置于无菌试管，定量稀释后以高效液相色谱仪（HPLC）检测EPS-citrate。HPLC标准溶液：取180℃干燥2h的枸橼酸钠对照品约0.156g，精密称定，置于100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。HPLC样品处理：取稀释20倍的前列腺液0.5ml加0.5ml 0.4mmol/L高氯本酸，混匀。10000r/min离心10min，取上清液过0.45μm滤膜，进高效液相色谱仪进行分析。
1.3 仪器及试剂 LC-6A高效液相色谱仪（HPLC，日本岛津公司）；枸橼酸钠对照品（广东台山新宁制药厂）；十八烷基硅烷键合硅胶填充柱（Inertsil ODS-3, 日本分光）。
1.4 统计学分析 均数以x±s表示，均数比较采用成组设计资料的t检验，率的比较采用χ2检验，SPSS 10.0统计软件处理相关数据，以P<0.05认为差异有显著性。
2 结果
正常对照组EPS-citrate平均值显著高于ⅢA和ⅢB组（t值分别为11.229,9.346,P均<0.001），ⅢA组和ⅢB组EPS-citrate平均值相比较差异也有显著性（t＝2.721，P<0.001）。从表2可以看出，正常对照组EPS-citrate数值均明显大于ⅢA和ⅢB组EPS-citrate数值，ⅢA组和ⅢB组EPS-citrate数值虽有一定的交叉，但如果以3.78作为界值，ⅢA型患者中24例EPS-citrate在此界值之下，6例位于其上；而ⅢB型患者只有5例在此界值之下，25例位于其上；二者分布差异有显著性（χ2=8.572，P<0.05）。表2 ⅢA、ⅢB、正常对照组EPS-citrate测量值
3 讨论
EPS-citrate生理状态下主要以三价枸橼酸形式存在，由前列腺上皮细胞分泌，发生炎症时，由于前列腺的分泌功能受到影响，EPS-citrate可出现不同程度的下降。根据这一特点，以前曾经通过测定EPS-citrate来诊断前列腺炎，但由于测定方法多为分光光度法，容易受到其他物质叠加作用的影响，因此测定的结果偏高、波动较大，难以制定统一的诊断标准。高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离技术，具有简便、快速、准确等优点［4］。本研究采用HPLC测定EPS-citrate,结果显示ⅢA和ⅢB型前列腺炎EPS-citrate含量均显著小于正常前列腺EPS-citrate含量, 且相互之间数值没有重叠,这一结果说明应用HPLC测量EPS-citrate可准确反映前列腺炎症引起的前列腺分泌功能障碍。按NIH分类标准，Ⅲ型前列腺炎又可分成ⅢA和ⅢB两大类，目前临床上主要根据前列腺液中有无白细胞来鉴别。由于两种前列腺炎在对抗生素的治疗上有明显差异，它们有着不同的病因、临床特征和自然转归，实际工作中EPS中的WBC数目受饮酒、刺激性饮食、前列腺非感染性结石、前列腺按摩或性生活的影响而变化很大，因此临床上鉴别ⅢA和ⅢB时如果仅仅根据EPS中的WBC数目有可能出现偏差。本研究采用HPLC测定EPS-citrate,结果显示ⅢA和ⅢB型前列腺炎EPS-citrate含量之间的差异性具有明显统计学意义，明显提高诊断灵敏度，可作为一个常规检测指标。对Ⅲ型前列腺炎患者进行EPS-citrate含量检测，对提高ⅢA、ⅢB型前列腺炎诊断的准确度及其治疗方案的选择提供依据。
【参考文献】
1 Krieger JN. Classification, epidemiology and implications of chronic prostatitis in North America, Europe and Asia. Minerva Urol Nefrol, 2004, 56:99-107.
2 Cooper TG, Weidner W, Nieschlag E. The influence of inflammation of the human male genital tract on secretion of the seminal markers alpha-glucosidase, glycerophosphocholine, carnitine, fructose and citric acid. Int J Androl,1990, 13:329-336.
3 Nadler RB, Koch AE, Calhoun EA, et al. IL-1beta and TNF-alpha in prostatic secretions are indicators in the evaluation of men with chronic prostatitis. J Urol, 2000, 164:214-218.
4 杨滨, 李化, 汤树良, 等. 高效液相色谱法测定山楂中枸橼酸的含量. 中国药学杂志, 2004, 39:697-699.
作者单位：250012 山东济南，山东大学齐鲁医院泌尿外科（*山东大学医学院在职研究生，现工作单位济南军区第四五六医院泌尿外科，△通讯作者）