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【关键词】 HPLC法 复方水杨酸冰片软膏
复方水杨酸冰片软膏为消毒防腐剂，收载于《国家药品监督管理局化学药品地方标准上升国家标准》第四册，原方法［1］采用有机溶剂提取后容量法测定其含量。本文采用高效液相色谱法测定含量 具有简单、灵敏度高、准确可靠等优点。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Waters2695高效液相色谱仪（二极管阵列紫外检测器）。
1.2 试药 复方水杨酸冰片软膏（A1、A2,市售）；水杨酸对照品（100106-200303）；苯甲酸对照品（100419-200301，均由中国药品生物检定所提供）；乙腈为色谱纯， 其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件及系统适用性 高效液相色谱柱为Tigerkin C18 （5μm， 4.6mm×1250mm）不锈钢拄，以庚烷磺酸钠溶液（取庚烷磺酸钠2g溶于900ml水中，用冰醋酸调pH至3.0加水至1000ml，摇匀）-乙腈（50：50）为流动相；检测波长为237nm。流速为1.0ml/min；柱温为30℃。进样量为20μl。水杨酸与苯甲酸峰的保留时间分别约为10、12min，理论板数按水杨酸计为4000，两峰的分离度为3.5。见图1。
2.2 线性关系 精密称取水杨酸与苯甲酸对照品12.20、24.24mg，置50ml容量瓶中，加流动相适量，振摇使溶解,并稀释至刻度，摇匀，精密称取5ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。在上述色谱条件下，分别进样10、16、 20、24、30μl（n=3），记录色谱图，以浓度X为横坐标，峰面积Y 为纵坐标，计算线性回归方程：
Y水杨酸=63123X-2457 r=0.99994
Y苯甲酸=93272X-22553 r=0.99985
2.3 加样回收率试验 取已知含量的样品3份（A1），精密称定，按“2.6”项下制备供试品溶液，精密量取续滤液5.0ml，各精密加入上述对照品溶液5.0 ml,摇匀，按“2.1”项下色谱条件测定,每份样品分别进样16、20、24μl（相当于标示量的80%,100%,120%）,计算回收率，结果低、中、高浓度回收率（n=3）分别为99.23%（RSD=0.7%）、99.32%（RSD=1.1%）、100.2%（RSD=0.7%）,平均回收率（n=9）为99.6%, RSD=0.8%。
2.4 稳定性试验 取“2.6”项下同一份供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定,分别于0、1、2、4、8h进样分析，峰面积基本不变，结果表明：该溶液稳定性良好，能满足测定要求。
2.5 精密度试验 取含量测定项下供试品溶液（批号A1），连续5次进样测定, 主峰面积的RSD为1.7 %。
2.6 含量测定 精密称取本品0.5g（约相当于水杨酸30mg）置50ml量瓶中，加甲醇约25ml，50℃水浴使溶解，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，冰浴2h，立即滤过，取续滤液放至室温，取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取“2.2”项下对照品溶液，进样20μl测定。按外标法以峰面积计算含量，测定结果见表1。表1 样品测定结果
3 讨论
检测波长的确定：用流动相稀释成含水杨酸与苯甲酸浓度均为10μg/ml的溶液，在220～300nm范围内扫描，均在237nm波长处有较大吸收，确定237nm为测定波长。
原方法采用有机溶剂提取蒸干后容量法测定含量，繁琐费时且误差大。本文采用高效液相色谱法测定其的含量，具有简单、灵敏度高、专属性强、准确可靠等优点。
【参考文献】
1 Drug Stundard of China by SFDA（国家药品监督管理局国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第四册）.WS-10001-（HD-0344）,2002,4:161.
（编辑：齐 永）
作者单位：116021 辽宁大连，大连市药品检验所