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2008年10月26日下午，质谱沙龙第十三期活动在中国食品发酵研究院会议室举行。会议有来自二炮总医院、朝阳医院、北大医学院、北医三院、空军总医院、中科院植物所、中科院过程工程所、AB公司等老朋友，还有来自岛津公司、摩尔美康实验室、安贞医院等新朋友。
首先由发酵研究院的林峰介绍发酵院的一些基本情况。发酵研究院是国资委下中轻集团下属的央企，前身隶属于轻工业部。发酵研究院主要的部门有：食品工程研究发展部、发酵工程研究部、酿酒工程技术研究发展部、标准和信息技术研究发展部、食品质量检测部五个事业部。林峰所在的蔡木易副院长的课题组属于发酵事业部，主要从事食源性肽的工业化开发，具体来说是利用一些天然的蛋白原料，比如大豆蛋白、玉米蛋白、海洋鱼皮胶原蛋白、鱼肉蛋白，变废为宝，做成一些可以食用的、具有特殊功能的肽，也利用质谱的方法对肽进行深入研究。
人体内45种氨基酸定量检测和肠内外营养
然后由二炮总医院的李鹏飞老师做题为《人体内45种氨基酸定量检测和肠内外营养》的报告，这是跟AB公司合作开发的方法，李老师谈了一些方法开发的体会。首先，李老师介绍了开发氨基酸定量检测方法的意义，尤其是临床方面的意义。在结果分析方面，主要介绍了氨基酸和相关疾病尤其是代谢类疾病之间的关系，比如肾脏类疾病，肝性脑病、神经系统疾病，以及氨基酸和静脉营养方面的关系等；单独就一种氨基酸如牛磺酸来说，它也具有很多临床意义。然后，介绍了以前的一些氨基酸测定方法及其原理，比如：氨基酸分析仪、HPLC带柱前衍生、HPLC配合其它的方法。但这些方法的问题是：无法区分某些氨基酸，如Asn/Glu-Gln，Thr/Ser，Gly/Ala，Iie/Leu，柱后衍生的温度比较高，检测时间较长。在新生儿筛查中，可通过测定十几种氨基酸对新生儿进行评价。还有一种CIL的同位素内标记物来检测。
iTRAQ试剂标记流程
李老师在AB公司仪器和试剂的基础上，开发了新型的检测方法。即利用iTRAQ试剂和45种氨基酸混合物的标准品，25分钟内测定样本中的45种氨基酸。在实验中，李老师也探索了一些条件，比如用十二烷基磺酸钠沉淀蛋白；采用正亮氨酸做内标校正系统误差；不能用全血，而是抽完全血半小时后离心，先分离出血浆，再沉淀蛋白；上清液转移到缓冲溶液用115试剂标记，最后吹干后把114标记的标准品加入，再进行LC-MS/MS检测；在LC-MS/MS检测时的技巧是分段扫描。这种方法的特点是：同时检测氨基酸种类更多（45种）；方法更为快速、简便（25分钟）；准确度更高（同位素内标）。另外，对于亮氨酸、异亮氨酸、别亮氨酸、正亮氨酸还有特殊的方法。如果装上“可立快”软件，方法开发会更容易。
详细原理可见：质谱沙龙第七期活动报道 中 “准确的定量和快速筛查方法：用LC/MS/MS做临床氨基酸测定”
李老师介绍的第二部分的内容是：肠内外营养的一些知识，可以帮助大家更好地了解营养科学和营养治疗的一些常识。
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AB质谱日常应用的保养和维护
接下来，由AB公司的资深技术工程师 刘谦为大家介绍了AB公司质谱日常应用的保养和维护知识。
首先介绍：API series、Qtrap、Qstar液质联用仪的维护计划，分为每天、每周、三个月的维护计划及其具体操作步骤，用列表表示，一目了然。同时，也介绍了MALDI源的质谱Voyager、4700、4800 MALDI-TOF型仪器的维护计划。刘工用图示的方法，具体介绍了：机械泵维护步骤、无信号诊断步骤、软件判断无信号故障、灵敏度低检查步骤、重复性差检查步骤、处理Analyst通信不上的9个步骤、处理4000 Series Explorer通信不上的4个步骤、如何延长分子泵的寿命、离子源喷口与orifice的位置的影响、常用部件号、常用试剂列表、常用工具列表、API仪器主要电路模块图。对于用户来说，这种系统的总结非常简洁、扼要，是关于快速维护仪器的极有帮助的报告。
报告下载：AB质谱日常应用的保养和维护
离子阱飞行时间质谱在小分子领域的应用
接着，由岛津公司生命科学部的应用工程师 万乐人 介绍了岛津的IT-TOF液质联用仪器的结构、特点、应用。下面是介绍的摘要：
设计IT-TOF的背景是：很多人很喜欢离子阱，它可以做多级质谱。但离子阱最大的问题是慢（duty cycle时间长），在很多情况下适应不了快速液相的要求，质量精度也比较差，岛津在离子阱后面加了TOF，就是要解决精度的问题，据万工介绍，某些用户反映，使用IT-TOF外标法可以做到2ppm的精度。
结构及其特点：
1）IT-TOF的离子源是正交离子源，在离子聚焦系统中，具有专利的八极杆技术，它的八极杆不是匀质的，末端的黑色部分涂了电阻材料，形成电位梯度，与其邻近电极的电压配合，将ESI连续离子流转变为脉冲离子流，进入离子阱。离子在八极杆聚集（accumulation）的时间是可以控制的，如果样品浓度很高，可以缩短聚集时间，如果浓度很低，可以增加聚集时间。
2）把TOF的检测和离子源完全分离开（decouple），即离子源和后面的检测没有关系。在离子从离子阱IT到TOF时，离子总是从离子阱的中心发射出去，不管用任何源，一次校正后，就可以一个月长期达到5ppm的质量精度。
3）这里，离子阱的工作原理是：用射频电场控制离子，环电极上的射频电场是零电位的，使离子可以很有效地进入，在入口端电极加上几十伏的电压，离子可以迅速进入离子阱，当离子进入以后，按照严格的时间程序，施加射频电场，离子在阱中高频振动，同时通入惰性气体冷却离子，离子聚焦在阱的中心，等待发射到TOF里。
IT-TOF的设计难点是：IT的离子如何发射到TOF？TOF是脉冲型检测器，进入到TOF的离子要有很高的动能，才能在TOF里飞行。岛津的两项设计比较独特，一个是弹道离子提取技术，一个是高频高压的开关。
弹道离子提取技术是岛津的专利，在离子抛出时，入端盖极和出端盖极成为两个直流的高电压板，入端盖极和出端盖极加上5万伏的高压，正离子加7KV，负离子加－7KV，然后可以高速抛出离子。
在直流抛出时，射频电场是一个妨碍作用。这时射频电场要迅速关闭，这就需要高频高压瞬时开关。大家知道，TOF做正负极切换是很危险的，很容易造成仪器的损坏。岛津因为采用高频高压瞬时开关技术，可以很方便实现快速正负离子切换。当然，它更重要地是解决了离子从阱中高速抛到TOF的问题。
另外，岛津还正在研发数字离子阱，也是利用高频高压瞬时开关技术。传统的射频离子阱射频是一个正弦波，马修方程是非常复杂的；如果做成一个方波，方波是很容易被控制的。但是要实现快速电压变化的话，也需要高频高压瞬时开关。
在介绍应用方面，主要介绍了多级质谱配合精确质量测定的应用。例子显示了在做任何一级质谱时，都可以做到很高的质量精度，5级、6级质谱都能做到5ppm。同时，IT-TOF价格有优势，比如有类似功能的Orbitrap（赛默飞世尔科技生产）的钱可以买两台IT-TOF。
在药物杂质分析应用方面，专门举了一个例子，是国内某标准研究部门做咖啡因的药物杂质分析。药物杂质分析是很困难的，过去很多药厂只能把每个杂质都纯化出来后做核磁共振。举例显示了用IT-TOF的快速、准确的鉴定方法。比如其中有一个三号杂质m/z 223鉴定很困难。首先，咖啡因的三级质谱碎裂模式是：195－138－111的碎裂。而杂质的碎裂方式为：223－166－139和149；四级质谱为：139－122和85；149－121和93。这些碎片再通过高质量精度质谱推断。233到166存在67的丢失，经判断为C2H3ON的丢失；166－149、139－122都是17的中性丢失，判断为NH3。这时用软件计算候选化合物元素组成，得到两个结果，其中只有第一个结果含N，C9H10N4O3，其中，四级质谱实测值93.0447，理论值93.0454，精度为-7ppm。再根据这个元素组成的结果，推断出可能的结构式，与各种检索方式相结合，获得最终比较可靠的结果。
最近大连化物所许国旺教授课题组发了一篇文章，并作为Analyst 9月份的封面，是关于代谢组学方面的工作。其中，液质是用IT-TOF来作的。这篇文章的主要贡献为：研究了一个典型的病例：强制性脊柱炎；因为代谢组研究的很多是小分子，所以该研究用了气质联用液质联用两种仪器，得到了比较全面的结果；血样和正常人的血样做对比，做了主成分分析，找到一些有意义的biomarker。
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GC/MS气相色谱质谱联用技术平台
最后由摩尔美康实验室的秦亚萍，为大家介绍了GCMS的一些基础知识和应用。包括GCMS构造、离子源、色谱柱、数据采集、定性、定量、应用等。其中，比较具有经验价值的是：
报告下载：GC/MS 气相色谱质谱联用平台