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Morpholinos敲除miRNA的特异性高

来源:生物通
摘要:GeneTools公司最新文章描述了一种利用吗啉寡聚核苷酸(Morpholinooligonucleotides,MF)进行miRNA活性敲除、成熟敲除和特异控制的新技术。miRNA研究的最新发现改变了我们对基因调节的认识,出现了许多miRNA活性的新报道。miRNA活性的实验操作已经成为分子生物学的一种标准工具,但这些技术目前仍处于改进中。初级miRNA(......

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        Gene  Tools公司最新文章描述了一种利用吗啉寡聚核苷酸(Morpholino  oligonucleotides,MF)进行miRNA活性敲除、成熟敲除和特异控制的新技术。

        microRNA调节基因特别是一大组基因的表达,在胚胎发育、心脏功能、癌症发生等过程中扮演重要角色。miRNA研究的最新发现改变了我们对基因调节的认识,出现了许多miRNA活性的新报道。miRNA活性的实验操作已经成为分子生物学的一种标准工具,但这些技术目前仍处于改进中。

        microRNA的成熟过程分为几个阶段。初级miRNA(primary  microRNA)转录自DNA,并折叠为一个stem-loop。酶Drosha将stem-loop与转录本(transcript)其它部份分开,接着酶Dicer将loop与stem分开。双链stem与蛋白Argonaute相互作用,Argonaute将双链劈开,释放其中的一条链,与剩下的一条链(guide  strand,引导链)形成miRISC复合体。miRISC复合体与mRNA相互作用,改变mRNA的表达。

        miRNA的活性敲除通常利用靶向miRNA引导链的寡核苷酸。靶向miRNA的Morpholino  oligonucleotides也能干扰miRNA的活性。单独利用这种技术很难控制敲除的特异性。然而,靶向未成熟miRNA的溶核加工位点(nucleolytic  processing  sites,生物通编者译)的Morpholino,能够抑制miRNA的成熟。如此,靶向初级miRNA的成套的不重叠的Morpholino  oligos,可以用于特异控制;如果靶向同一个miRNA的两个不重叠的oligo引发的表型相同,就能说明表型是由于靶miRNA的活性被敲除引起的,而非脱靶效应。这种技术的详细内容刊登于:

        Kloosterman  WP,  Lagendijk  AK,  Ketting  RF,  Moulton  JD,  Plasterk  RHA.  

        Targeted  inhibition  of  miRNA  maturation  with  morpholinos  reveals  a  role  for  miR-375  in  pancreatic  islet  development.  PLoS  Biol.  2007;5(8):  e203.biology.plosjournals.org/perlserv/?request=get-pdf&file=10.1371_journal.pbio.0050203-L.pdf

        已刊载电子版。

        GENE  TOOLS公司成立于1997年,位于AVI  Biopharma公司旗下,是一家生产生物学和医学研究所需的序列个性化的Morpholino  oligos的生物技术公司。其Morpholino产品从2000年开始商业化,目前已经有1700篇研究型论文涉及到Morpholino。

        GENE  TOOLS的初级产品Morpholino反义核苷酸,是合成分子,阻断特定基因活性的Morpholino。Morpholino的亚单位的连接顺序决定了受其阻断的目的基因。GENE  TOOLS公司根据客户需要,设计关闭目的基因活性的个性化Morpholino。GENE  TOOLS公司通常每周能够合成200多个Morpholino。

        GENE  TOOLS的客户一般是大学、研究所和制药公司的研究人员。

        发育生物学家通过将Morpholino  oligos注入卵子或者斑马鱼、青蛙、海鞘、海胆等的受精卵中研究胚胎发育细胞生物学家利用Morpholino  oligos研究新经过测序的基因的功能

        医疗工作者利用Morpholino  oligos研究癌症等疾病的细胞学机制

        想获得关于Morpholino  oligos的更多信息,请登陆GENE  TOOLS网站(www.gene-tools.com)并阅览文章(en.wikipedia.org/wiki/Morpholino)  (生物通  小粥)
作者: 2007-7-31
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