整合素（integrin）是一种与胞外基质结合的异源二聚体跨膜蛋白，在细胞粘附和迁移中发挥重要作用。有活性的整合素向细胞前缘的与基质相对的表面聚集，结果是肌动蛋白应力纤维（actin stress fibers）等多种蛋白聚集形成灶性粘附复合体(focal complex，FAC)。细胞迁移离不开FAC在细胞前缘聚集，细胞尾部的FAC分解。整合素通过循环内体（endosomes）从细胞尾部运动到细胞前缘。目前，研究人员对调节整合素内在化的机制不是十分清楚。
Numb是一种载物特异性接头蛋白，与许多内吞作用蛋白结合，有下调Notch信号传递的作用（注：Notch是一种跨膜受体，能够影响细胞增殖和分化）。日本名古屋大学T.Nishimura等人之前已经证实Numb定位在海马趾神经元处于生长过程中的突触的尖端，在粘附分子L1的内在化中发挥作用。此次，Nishimura等决定研究Numb在介导整合素内吞作用和细胞迁移中的作用。
Nishimura等进行免疫组化实验，发现Numb和披网格蛋白结构（clathrin-coated structures）在各种内皮和表皮细胞中共定位。野生型和突变型Numb蛋白的绿色荧光蛋白分析实验结果显示，α-衔接蛋白绑定基序是Numb与批网格蛋白结构相互作用所必须的。
在单层划痕法（wounding assay）检测中，Numb向正在迁移的细胞的前缘聚集（紧跟片足），定位在黏着斑周围。聚合激动蛋白（F－actin）解聚，这种相关性被抑制。
免疫着色实验证明Numb和β1整合素在FAC共定位；重组Numb与β1、β3整合素共沉淀，但不与其它FACs成员共沉淀。
研究人员用RNAi沉默Numb后，正在迁移的HeLa细胞中β1整合素阳性内体数量下降，向整合素配体迁移的HeLa数量明显下降。
共免疫沉淀反应(coimmunoprecipitation)实验揭示Numb结合PAR(缺陷性分配，partitioning defective)极化复合体PAR3。PAR3定位在发生极化的、正在迁移的细胞的前缘，其组分之一——非典型蛋白激酶C（atypical protein kinase C ，aPKC) 在试管和HeLa细胞中能磷酸化Numb，结果Numb不再与整合素结合。
研究人员利用所设计的模型，发现Numb与自由整合素分子结合（而不是破坏FACs），并将其募集到网格蛋白结构以启动整合素循环，Numb的定位和功能受aPKC的负调节。（生物通 小粥）
作者：
2007-7-17