人工进化丙型肝炎病毒C和E1区噬菌体展示文库的构建及初步筛选

2007年04月10日 中华肝脏病杂志 2006 Vol.14 No.9 P.666-669 8 （西安）为了构建人工进化丙型肝炎病毒(HCV)C和E1区基因噬菌体展示文库，并进行初步筛选。研究者 应用DNA改组技术进行不同基因型的HCV C和E1区基因的人工进化，克隆于噬菌体载体，以辅助噬菌体M13KO7援救后，构建噬菌体展示文库，应用HCV C和E1区单克隆抗体进行初步筛选。随机选取筛选后的20个噬菌体克隆，用高滴度HCV阳性血清通过双抗体夹心酶联免疫吸附法进行抗原抗体结合反应，以正常人血清作为对照。结果 人工进化HCVC和E1区噬菌体展示文库库容达1.64×106，重组率为0.86。以C和E1区单克隆抗体淘筛4轮，噬菌体展示文库得到特异性富集。筛选获得12个阳性克隆。可见 所构建的噬菌体展示文库的库容和多样性符合筛选的要求。筛选获得的阳性克隆具有较好的抗原抗体结合反应活性，表现出较好的亲和力。