2005年12月12日 中华传染病杂志 2005 Vol.23 No.4 P.229-232
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（上海）为了构建人源单克隆抗-HBs Fab片段-IFN-α表达载体，对原核表达该融合蛋白的可行性及其效果进行实验研究，研究者用聚合酶链反应(PCR)体外扩增目的基因IFN-α，单酶点插入已含人源抗-HBs Fab基因的载体，插入点位于轻链基因3'末端，利用酶切、PCR鉴定，测序筛选正确插入的阳性克隆，转化大肠埃希菌Top10，挑选单克隆表达、纯化目的蛋白，用酶联免疫吸附法(ELISA)检测融合蛋白的抗原性，用Dot-blot和WISH细胞检测其生物学活性。结果利用插入了人源抗-HBs Fab段基因及IFN-α基因的pBAD/gⅢA原核表达系统，成功表达了具生物活性的轻链与IFN-α的融合蛋白，其与HBsAg的亲合力与抗-HBs-Fab相近，而且具有干扰素的活性。融合蛋白对HepG2.2.15细胞初步实验结果亦显示出其具有良好的靶向性及致凋亡作用。可见轻链与干扰素IFN-α融合蛋白的成功表达表明，应用原核系统能够同时表达特异抗体和其介导的某些生物活性因子，不失为一种经济、有效的方法，为特异抗体及其介导融合蛋白的制备和
临床应用提供了实验依据。
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