丙戊酸对脊髓性肌萎缩症患者神经元样细胞SMN2基因mRNA表达的影响

2006年07月11日 中华神经科杂志 2006 Vol.39 No.3 P.159-162 28 （长沙）为了探讨丙戊酸(VPA)对脊髓性肌萎缩症(SMA)患者神经元样细胞SMN2基因 mRNA表达的影响。研究者用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法对SMA患者进行基因诊断。诱导患者的骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞作为细胞模型，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和测序检测SMN2基因转录产物，半定量RT-PCR检测VPA干预前后SMN2 mRNA的表达。结果 RT-PCR扩增出266 bp和212 bp两条带，分别为全长转录产物(fl-SMN mRNA)和转录时跳过外显子7的产物(SMNΔ7 mRNA),VPA干预后，fl-SMN mRNA和SMNΔ7 mRNA表达均比干预前明显增加，有量效关系(干预前以及1、2、5、10 mmol/L VPA干预后fl-SMN mRNA和SMNΔ7 mRNA的表达分别为0.210±0.035、0.282±0.041、0.351±0.020、0.450±0.052、0.553±0.035，P<0.05和0.670±0.026、0.703±0.050、0.750±0.024、0.807±0.042、0.870±0.034，P<0.05),且fl-SMN mRNA增加的幅度大于SMNΔ7 mRNA，fl-SMN mRNA/SMNΔ7 mRNA的比值也逐渐增大。可见 SMA患者神经元样细胞SMN2基因存在选择性剪接，VPA可能抑制选择性剪接并改善SMN2的转录，从而有望成为治疗SMA的药物。