hTERT反义寡核苷酸抑制Hut78细胞端粒酶活性及诱导细胞凋亡的研究

2006年04月20日 中华皮肤科杂志 2005 Vol.38 No.12 P.751-754 8 （南京）为了探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸对皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞株端粒酶活性及细胞生长的影响，为CTCL基因治疗提供新的基因靶点，研究者采用脂质体介导的基因转染方法，将不同浓度(10μmol/L、20 μmol/L、30 μmol/L)的寡核苷酸分别导入CTCL细胞株Hut78中；分别于不同的时间，应用端粒酶重复序列扩增及酶联免疫吸附方法(PCR-ELISA)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞仪技术等动态观察转染细胞中端粒酶活性、hTERT mRNA表达以及细胞凋亡的变化。结果经hTERT反义寡核苷酸(AODN)作用72 h后，细胞端粒酶的活性明显下降，hTERT mRNA的表达减弱，并可观察到细胞凋亡，凋亡细胞发生率为13.05%。细胞生长抑制作用有明显的时效性，以30μmol/L、72 h时下降最明显。而有义寡核苷酸(SODN)组和对照组以上指标均无明显变化(P＞0.05)。可见hTERT反义寡核苷酸可显著抑制CTCL细胞的端粒酶活性，抑制细胞生长增殖，诱导细胞凋亡。