猿肾病毒40大T抗原基因永生化大鼠星形胶质细胞株的生物学特性

2005年11月16日 中华麻醉学杂志2005 Vol.25 No.6 P.441-444 11 （广州）为了研究猿肾病毒40大T抗原基因永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST)的生物学特性，探讨其作为转基因细胞镇痛载体的可行性，研究者取大鼠大脑皮层星形胶质细胞(AST)和IAST进行体外培养，观察细胞的形态学、超微结构以及传代复苏的情况；绘制细胞生长曲线，免疫细胞化学法检测细胞胶质纤维酸性蛋白的表达；5'溴-2-脱氧尿苷掺入法和流式细胞仪检测细胞增殖周期；双层软琼脂克隆形成实验和裸鼠接种实验检测细胞的致瘤性。结果AST体外传代至10代左右即出现复制衰老现象，而IAST可连续传代，未出现衰老迹象；细胞生长呈单层，锚着依赖和接触抑制；传代、冻存和复苏对IAST的存活率无影响，而第6代和第10代AST的存活率降低；与第6代和第10代AST相比，IAST增殖较为旺盛，增殖指数较高，群体倍增时间较短、增殖率较高；IAST胶质纤维酸性蛋白免疫染色阳性，软琼脂培养无集落形成，裸鼠接种无致瘤性。可见大鼠IAST是增殖活跃的非恶性转化细胞，可安全地用于转基因细胞移植镇痛研究。