神经营养素-4-神经短肽NAPVSIPQ融合基因对兔眼虹膜色素上皮细胞的转染和保护作用

2007年04月05日 中华眼科杂志 2006 Vol.42 No.11 P.1008-1012 12 （西安）为了探讨神经营养素-4(NT4)-神经短肽(NAP)对兔虹膜色素上皮细胞(IPECs)的保护作用。研究者分离培养兔IPECs，采用非对称互补引物/模板方法构建神经短肽NAP和神经营养因子NT4的融合基因，构建重组腺相关病毒 (rAAV) -绿色荧光蛋白(GFP)和rAAV-NAP，并以此转染体外培养的兔IPECs，以荧光表达来检测病毒的转染情况。对体外培养的兔IPECs进行紫外线光损伤，并用MTT法和流式细胞仪来检测NAP对兔IPECs的保护作用。结果 转染了rAAV-GFP的兔IPECs表达了明显的GFP荧光。与对照细胞相比，转染了rAAV-NAP的兔IPECs经紫外线光损伤后，细胞的增殖正常，细胞凋亡率降低。可见本研究所构建的rAAV-NAP可有效地转染体外培养的兔IPECs，NAP对兔IPECs有光保护作用。