大鼠局灶性脑缺血后FADD和Daxx的表达

《中华神经科杂志》2007年第40卷第11期 中国研究者探讨了大鼠脑缺血再灌注后Fas相关蛋白FADD和Daxx在缺血半暗带的表达变化。研究者采用的方法是①将SD大鼠随机分为假手术组和模型组。线栓法制备大鼠大脑中动脉梗阻（MCAO）模型，缺血2h后恢复再灌注，再灌注后1、3、6、12和24h处死动物。RT—PCR、免疫组织化学、Westernblot等方法分别检测缺血半暗带FADD、DaxxmRNA和蛋白的表达变化；②免疫荧光双标分别标记神经元核区和FADD及Daxx蛋白染色区，激光扫描共聚焦显微镜观察二者在缺血再灌注前后神经元的定位。结果发现再灌注3h假手术组可以检测到少量的FADDmRNA和蛋白表达（mRNA：0．441±0．038；蛋白：156．78±13．04），模型组FADDmRNA和蛋白表达变化一致，在再灌注3h开始上升（mRNA：0．628±0．059，P〈0．01；蛋白：131．28±5．99，F=15．692，P〈0．01），12h达到高峰（mRNA：0．971±0．070，F=56．233，P〈0．01；蛋白：104．36±8．55，P〈0．01），24h显著下降（mRNA：0．551±0．042，P〈0．05；蛋白：123．01±11．87，P〈0．01），模型组FADDmRNA和蛋白表达变化一致，在再灌注3h开始上升（P〈0．01），12h达到高峰（P〈0．01），24h显著下降（P〈0．05）；假手术组可以检测到较高的DaxxmRNA和蛋白表达；模型组DaxxmRNA和蛋白表达变化一致，再灌注3h开始上升（P〈0．01），此后持续上升，一直至24h仍维持较高水平表达（P〈0．01）；激光扫描共聚焦显微镜显示脑缺血再灌注后FADD的免疫活性位于胞质，Daxx的免疫活性从胞核向胞质移位。由此，研究者得出结论，大鼠脑缺血急性期FADD、DaxxmRNA和蛋白表达增加，可能参与了脑缺血后促凋亡作用。