脐血CD3AK细胞培养上清液对白血病细胞株HL-60细胞的影响

2006年04月03日 中华儿科杂志 2005 Vol.43 No.12 P.899-903 18 （武汉）为了在体外实验中，研究脐血CD3AK细胞培养上清液(cord blood CD3AK supernatant， CS)对HL-60细胞增殖、分化和凋亡的影响，研究者以不同浓度的CS(10% CS、15% CS、20% CS)作用于不同时间(3 d，6 d和9 d)的HL-60细胞为实验对象，应用细胞计数法结合锥虫蓝拒染法研究CS诱导的HL-60增殖情况。应用流式细胞仪分析CS作用前后细胞周期及细胞表面分化标志CD11b的变化，光学显微镜下观察细胞形态变化，氯化硝基唑蓝(NBT)还原实验研究细胞的NBT还原阳性百分率，从而研究HL-60细胞的分化。应用电子显微镜观察细胞凋亡，原位末端标记法研究CS作用前后HL-60细胞的凋亡变化。结果随CS作用时间的延长和剂量的增加，细胞增殖速度逐渐减慢.细胞周期分析显示，CS作用后G0期和G1期显著增多，S期显著减少，G2期和M期无明显变化，说明CS使细胞阻滞在G0和G1期。随CS作用时间的延长，细胞体积逐渐增大，3 d后被诱导的细胞表面开始表达分化标志物CD11b并出现细胞核型变化，NBT阳性细胞增多，随CS浓度的增加和作用时间的延长，这些变化越明显。20% CS诱导72 h后，被诱导的细胞出现凋亡，随诱导时间延长，凋亡细胞增多。可见 CS能抑制HL-60细胞的增殖，诱导HL-60细胞分化和凋亡。