碱基错配对短发夹RNA逆转白血病细胞耐药作用的影响

2007年01月29日 中华血液学杂志 2006 Vol.27 No.11 P.736-738 7 （成都）为了探讨碱基错配对短发夹RNA(shRNA)逆转白血病细胞耐药作用的影响。研究者针对mdr1基因mRNA合成一条序列正确的shRNA及正义链少1个碱基的对应错配shRNA，构建一对抗mdr1 shRNA真核表达载体，脂质体介导转染白血病耐药细胞株K562/A02。采用实时荧光定量RT-PCR检测mdr1 mRNA表达；柔红霉素泵出实验检测P-gp外排泵功能；MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性。结果 序列正确和对应错配shRNA真核表达载体均明显下调mdr1 mRNA的表达，降低细胞膜P-gp外泵功能，60 min柔红霉素泵出率分别为6%和10%，显著低于对照组的45%；细胞内柔红霉素平均荧光强度分别为9.51和7.09，明显高于对照组的2.80；对阿霉素药物敏感性的相对逆转率为90%和87%。可见 正义链碱基错配shRNA对RNA干扰功能无明显影响，与序列正确的shRNA一样可有效逆转mdr1所致的耐药。