两步聚合酶链反应法快速诊断感染性角膜炎和眼内炎病原体的研究

2005年05月27日 中华眼科杂志2004 Vol.40 No.12 P.819-823 12 （南通）为了探讨两步聚合酶链反应(PCR)技术快速检测感染性角膜炎和眼内炎病原体的临床诊断效果，研究者采集51例感染性角膜炎患者的角膜刮片或泪液和16例眼内炎的玻璃体液，先用多重聚合酶链反应(MPCR)技术检测病原体是细菌、真菌还是单纯疱疹病毒， 然后用特异性聚合酶链反应(SPCR)检测病原体细菌或真菌的种类。比较PCR与微生物培养所需的时间和阳性率及其与临床诊断的符合率。结果 67例标本经MPCR检测，有52例(77.6%)阳性(8例为两种病原体阳性)。其中，细菌阳性的28例经SPCR检测，有7例(25.0%)为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌或铜绿假单胞菌；真菌阳性的15例经SPCR检测，有8例(53.3%)为念珠菌、曲霉菌或镰刀菌.微生物培养21例(31.3%)阳性(1例为两种病原体阳性)。MPCR检测细菌和真菌的阳性率(58.2%)高于微生物培养的阳性率(χ2= 13.50，P<0.005)。微生物培养时间需72～96 h，两步PCR扩增只需8 h。临床诊断的感染性角膜炎与实验室检测符合率为54.8%。可见两步PCR法检测病原体具有速度快、阳性率高等优点，有助于感染性眼病的快速病因诊断。