2008年05月09日 中国医学论坛报
莱伯先天性黑蒙(LCA)是常染色体隐性
遗传基因突变导致的视网膜营养不良中最严重的一类,通常在婴儿出生起即有视力障碍。近日,美国和英国的学者分别报告,通过基因疗法可以改善部分患者的症状(N Engl J Med 2008年4月27日在线发表)。
LCA:基因突变导致的视网膜营养不良
LCA是由于常染色体隐性遗传导致的视网膜营养不良,可导致视网膜变性、视力受损。其中,包括RPE65在内的一系列基因突变可导致LCA患者从出生起视力受损,在30年内完全失明。LCA2即与RPE65基因突变有关。目前尚无治疗LCA的有效方法。
RPE65名为视网膜色素上皮基因,编码视网膜色素上皮中一个分子量为65 kDa的重要蛋白质,参与视黄醛等物质循环、视色素视紫红质再生等关键步骤。人若缺乏该基因编码的蛋白质,则11-顺式视黄醛缺失,视杆细胞对光照刺激将不起反应。视锥细胞功能不依赖RPE65编码的蛋白质,因此部分LCA患者在儿童时期会存有一些通过视锥细胞维持的视功能。但随着时间的推移,视锥细胞变性,最终这部分视觉功能也会丧失。
治疗LCA的基因疗法
英国伦敦大学学院的Bainbridge等和美国宾夕法尼亚大学的Maguire等近日同时报告,用包含RPE65互补DNA(cDNA)的重组腺病毒伴随病毒(AAV)载体对LCA患者进行视网膜下注射,能够改善部分患者的视功能。
此前有动物研究显示,以重组AAV作为载体,将包含人RPE65编码序列和启动子区域序列的cDNA片段导入,从视网膜下注射入天然模型动物瑞典布里犬(Swedish Briard dog,该种犬有天然RPE65突变),可以改善该动物的视功能(Genomics 1999, 57: 57)。
Bainbridge等的研究纳入了3例因RPE65突变导致早发性严重视网膜营养不良的患者,年龄17~23岁,接受治疗眼的视敏度均低于20/120。研究者给患者视网膜下注射携带RPE65 cDNA的AAV载体,观察治疗后第2、4、6个月时的效果。结果发现,没有患者发生严重不良事件。所有患者的视敏度和外周视野均没有显著的
临床改善。通过视网膜电图没有检测到视网膜反应。只有1例接受注射后12个月的患者,在微视野仪和暗适应视野仪下显示出视功能显著改善。在主观视觉动感测试上,该患者也显示出了改善。
Maguire等为3例年龄在19~26岁之间的LCA2患者注射了携带RPE65 cDNA的AAV载体,观察注射后5个月的疗效。
结果显示,每例患者都在主观视敏度检测中显示出了视网膜功能改善。瞳孔光反射测试显示,治疗后患者对光刺激的反应加强。有1例患者发生了无症状的黄斑裂孔,被认定属于不良事件,但该患者视网膜功能仍得到部分恢复。
该疗法有待更多研究验证
美国哈佛医学院的Miller医师在述评中提到,目前已经发现7种基因突变与LCA有关,其中RPE65基因与6%的LCA有关。在动物实验中,单次注射携带RPE65的AAV可以改善视功能,效果可持续8年。此次两组研究者均采用了这样的基因疗法,但是视敏度检查结果显示,两组患者改善并不一致。Miller认为,视敏度的检测本身比较主观,因此这样的不一致并没有实际意义。另外,Maguire等还检查了患者的瞳孔对光反射,这是一个衡量视网膜功能的客观指标,对于考察所用方法的疗效更有意义。有1例患者出现了黄斑裂孔,虽然没有临床意义,但有待更深入的研究(N Engl J Med 2008年4月29日在线发表)。
两组研究者和Miller均认为,该基因疗法治疗上述LCA患者在短期内比较安全,也有一定效果,但需要更大规模的临床试验、更长时间的随访。注射更大剂量的AVV是否会导致更加严重的并发症、视网膜未完全变性的年轻患者接受该疗法能否获得更好的效果、是否能发现效果更理想的基因载体或基因片段等,都是有待解答的问题。
作者：
2008-5-9