逆转录病毒介导的核苷酸还原酶M2亚基靶向RNA干扰：一种胰腺癌的新型治疗策略

2005年08月19日 Surgery. 2004 Aug;136(2):261-9. 16 核苷酸还原酶M2亚基（RRM2）过表达能够增加肿瘤对化疗的耐受性及癌细胞的侵袭性。美国的一项研究认为逆转录病毒携带的小分子干扰RNA（siRNA）可以增加胰腺腺癌对吉西他滨的敏感性，并减轻肿瘤细胞的侵袭性。

研究者以表达RRM2特异性siRNA（psiRRM2）的复制缺陷型逆转录病毒为载体构建了稳定表达RRM2的PANC1、MIAPaCa2、BxPC3和Capan2细胞。单个碱基错配载体(psiControl)作为对照。定量测定核苷酸还原酶的活性，并评价吉西他滨的IC50。吉西他滨处理细胞后进行TUNEL染色及caspase活性测定。利用Matrigel Boyden 室定量测定细胞的侵袭性。测定NF-kB的活性及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达及其活性。

结果显示，RRM2在psiRRM转染体中稳定并特异性表达，但在psiControl转染体中没有表达。与psiControl转染体相比，PsiRRM转染体显示了较低的吉西他滨IC50，较明显的吉西他滨诱导的凋亡以及较强的caspase-3激活。另外，psiRRM转染体中的侵袭性及NF-kB活性、MMP-9的表达及活性也较psiControl 转染体减轻。

该研究表明，RRM2基因沉默可减轻胰腺腺癌细胞的侵袭性以及对吉西他滨 的化疗耐受性。逆转录病毒siRNA转移能够有效地诱导稳定的RNAi，从而实现基因功能的剥离，因而可能成为一种新的胰腺癌治疗方法。