青蒿琥酯对骨髓瘤细胞SP2／0的作用观察及其机制的初步探讨

2008年06月10日 《中华肿瘤杂志》-2008年30卷1期 -16-20页 医学空间（MEDcyber.com）6月10日消息，该项研究目的是观察青蒿琥酯对骨髓瘤细胞SP2／0的增殖抑制及促凋亡作用，并对其机制进行初步探讨。方法采用利用二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度青蒿琥酯对SP2／0细胞作用24、48和72h后的增殖抑制作用，并观察其对SP2／0小鼠移植瘤的抑瘤效应。常规Giemsa染色、DAPI荧光染色以及透射电镜下观察细胞凋亡的形态学变化，琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA梯带，利用AnnexinV／PI双染和流式细胞术检测青蒿琥酯作用后24、48hSP2／0细胞的凋亡率和细胞周期。Westernblot检测核因子κB（NF—κB）065及其抑制蛋白（IKB）d的水平，酶联免疫吸附（ELISA）法检测NF-κB065的转录活性。结果2μg／ml青蒿琥酯作用24h，对SP2／0细胞增殖抑制率即达33．0％；40μg/ml青蒿琥酯作用72h，细胞增殖抑制率达91.9％，呈现出明显的时间、剂量依赖性。50、100和200mg·kg^-1·d^-1的青蒿琥酯对SP2／0小鼠移植瘤的抑瘤率分别为17.8％、36.5％和48．0％。2μg/ml青蒿琥酯作用24h，G0／G1期细胞数目增多（50．6％±0．8％），凋亡率为7．7％；40μg/ml青蒿琥酯作用48h，G0／G1期细胞达75．3％±7.0％，凋亡率为78.7％，呈时间、剂量依赖性。胞核中NF—κBp65蛋白减少，胞浆中IκBα蛋白的表达增加，NF—κBp65的转录活性降低。由此得出结论青蒿琥酯对骨髓瘤细胞SP2／0有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用，是一种潜在的抗骨髓瘤药物，其作用机制与抑制NF—κB p65的转录活性有关。