高效液相色谱法测定维药夏塔热片中没食子酸的含量

提要：目的：建立维药夏塔热片中没食子酸的含量测定方法。方法：高效液相色谱法，Shimadzu ODS柱，流动相为0.1％磷酸-甲醇(93：7)，检测波长27Onm。结果：没食子酸在1.92～15.68μg/ml内呈良好的线性关系，r=0.9997，平均回收率为100.5％，RSD为1.0％(n=5)。结论：该方法简便、快速、重现性好，能控制该制剂的质量。
关键词：夏塔热片；维药；没食子酸；高效液相色谱法
维药夏塔热片是由地锦草、芦荟、诃子肉、司卡摩尼亚脂等药材组成的维吾尔医经典方剂，记载于《中国医学百科全书》维吾尔医学分卷第6册。根据维吾尔医药理论，该制剂具有清除异常黏液质、胆液质及败血、消肿止痒，用于治疗手癣、体癣、足癣、花斑癣、银屑病、过敏性皮炎、带状疱疹、痤疮等疾病。为了控制该制剂的质量，保证临床用药安全、有效。本文参照文献采用高效液相色谱法测定没食子酸的含量。结果表明该方法简便、快速、准确、重现性好，能够控制该制剂的质量。
1 仪器、试剂与试药
1．1 仪器：Shimadzu-LC2010四元低压梯度液相色谱仪；色谱柱：Shimaszu ODS(4.6×150mm．5μm)；Shimadzu
CLASS-VP V6．12 SP3数据工作站。
1．2 试剂：没食子酸对照品购自中国药品生物制品榆定所。批号0831—9503，甲醇、磷酸(分析纯)，水为重蒸馏水
1．3 试药：维药夏塔热片(新疆维吾尔自治区维吾尔医医院制剂中心提供。批号为20030318、20030330、20O30408)。
2 方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱Shimadzu ODS柱(4.6×150mm，5μm)；流动相：0.1％磷酸-甲醇(93：7)，检测波长27Onm；
流速：1.Oml/min；柱温：室温。
2．2 溶液的制备
2．2．1 对照品溶液的制备：精密称取对照品没食子酸2.4mg置5Oml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得对照品储备溶液。
2 2．2 供试品溶液的制备：取本品20片，研细混匀，取0.2g置lOOml量瓶中，加甲醇约50ml，超声提取30分钟、放冷后，用甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液用微孔滤膜(0.45μm)滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。
2．2．3 阴性对照样品溶液的制备：取缺地锦草、西青果、诃子、毛诃子的阴性样品0.2g，依供试品溶液同法操作制备阴性样品溶液，取阴性样品溶液，注入液相色谱仪，图谱证明阴性无干扰。2．3 线性范围的考察：分别精密吸取对照品溶液(48μg/ml)0.4、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0ml至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密吸取10μl注入液相色谱仪。以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标做标准曲线．得线性回归方程为Y=18618X一70.627、r=0.9997，结果表明没食子酸在1.92～15.68μg/ml范围内，线性关系良好。
2．4 方法学考查
2．4．1 精密度试验：取重现性测定项下的样品一份，重复进样5次，没食子酸峰面积分别69674、69178、69559、70106、69384面积平均值为69580，RSD=0.5％。
2．4．2 重现性试验：同一批样品(20030318)分别制成5个供试液，每次进样10μl，测得没食子酸含骨分别为5.61、5.62、5.66、5.65及5.72mg/g，平均含量为5.67mg/g，RSD=0.7％。
2．4．3 稳定性试验：日内：同一批号样品(20030318)制备成供试液，每间隔2小时进样1次，每次进样10μl，共进样5次；日间：同一批号样品(20030318)制备成供试液，放置24、36、48小时进样10μl，结果RSD=1.4％。
2．4．4 添加回收率试验：精密称取供试品(20030318)0.1007g共5份，置100ml量瓶中，每份分别加入没食子酸对照品溶液(0.096mg/g )6ml，加甲醇50ml，依供试品溶液同法操作、滤过后、进样10μl，测定回收率，结果见表。
2．5 样品含量测定：取3批样品，按供试品溶液制备法处理，分别进样10μl、注入液相色谱仪，照外标法测定，以峰面积计算含量。
参考文献
[1]易沙克江·马合穆德主编．中国医学百科全书．维吾尔医学分卷第6册[M]．鸟鲁木齐：新疆人民卫生出版社，
1995．556．
[2]陈发奎主编．常用中草药有效成分含量测定[M]．北京：人民卫生出版社，1997．