高效液相色谱法测定复方呋喃西林滴鼻液中主药的含量

摘要：目的：建立高效液相色谱法(HPLC)测定复方呋喃西林滴鼻液中呋喃西林和盐酸麻黄碱的含量。方法：采用HPLC，Agilent Eclipse×OB-C18色谱柱，乙腈：0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(22：78)为流动相，检测波长为255nm。结果：呋喃西林在8～32μg/ml浓度范围内，盐酸麻黄碱在400～1600μg/ml浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系，其相关系数分别为r=0.9998和r=0.9999，呋喃西林的平均回收率为99.66％(RSD为0.68％)，日内RSD为0.38％；日间RSD为1.25％；盐酸麻黄碱的平均回收率为99．90％(RSD为0.44％)，日内RSD为0.29％，日间RSD为1.12％。结论：本法简便、快速、结果准确，可用于测定复方呋喃西林滴鼻液的含量。
关键词：呋喃西林；麻黄碱，盐酸；滴鼻液；高效液相色谱法
复方呋喃西林滴鼻液 (呋麻滴鼻液，每100ml中含呋喃西林0.02g，盐酸麻黄碱1g)为临床上常用的滴鼻液，用于冶疗鼻炎、鼻粘膜肿胀，具有消炎、收缩血管的作用。其含量测定已见报道的有双波长法 ，多波长吸收度比值差法，吸收度线性组合分光光度法 等。本文采用HPLC法同时测定呋麻滴鼻液中呋喃西林和盐酸麻黄碱的含量，方法简便、快速，检测结果准确，现报道如下。
1 仪器及试药
Agilent 1100液相色谱仪(四元泵，手动进样器，紫外检测器，工作站，真空脱气机)(美国安捷伦公司)；盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号1241—20001)，呋喃西林对照品(济南金达药化有限公司，批号：020402，含量为99.12％)，呋麻滴鼻液(本院制剂室自制)，乙腈(中国医药集团上海化学试剂公司，色谱用，批号20020530)，磷酸二氢钾(南京化学试剂厂，分析纯，批号020311)，重蒸馏水(本院自制)。
2 方法与结果
2．1 色谱条件 ’
Agilent Eclipse-OB-C8柱(5μm，4.6mm×150mm)；流动相：乙腈：O.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(22：78 v／v)，流速：1.0ml/min；检测波长：255nm；进样量20μl；柱温25℃。
2．2 系统适应性试验
按处方比例配制不含主药的辅料溶液，盐酸麻黄碱对照品及呋喃西林的混合溶液以及呋麻滴鼻液，按“2．1”项下条件进行测定，记录色谱图，结果呋喃西林理论板数为12549，出峰时间为3.60min左右，盐酸麻黄碱理论板数为3773，出峰时间为1.97min左右；呋喃西林和盐酸麻黄碱的分离度达7.2。在2．5 min附加成分的峰与盐酸麻黄碱的分离度达3.8，而5min时附加成分的峰与呋喃西林的分离度达6.5，因此附加成分不干扰呋喃西林和盐酸麻黄碱的含量测定。
3．2 标准曲线的制备
呋喃西林：精密称取呋喃西林对照品20mg置100ml量瓶中，加注射用水溶解并稀释至刻度作为贮备液。摇匀，精
密吸取贮备液2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0 ml置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别进样20μl进行测定，记录其峰面积(A)，将测得的峰面积对浓度进行线性回归，得回归方程为A=77.5C一6.124(r=0.999 8)，线性范围为8～32μg/ml。盐酸麻黄碱：精密称取盐酸麻黄碱对照品0.1g置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度作为贮备液。摇匀，精密吸取贮备液2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别进样20μl进行测定，记录其峰面积(A)，将测得的峰面积对浓度进行线性回归，得回归方程为A=0.925C一12.69(r=0.999 9)，线性范围为400～1600μg/ml。
3．3 精密度试验
分别配制高、中、低3种浓度的对照品溶液，分别重复进样5次，测定两者的峰面积，结果呋喃西林和盐酸麻黄碱的日内RSD分别为0.4％和0.3％，日间RSD分别为1.25％和1.12％。
3．4 回收率试验
精密称取呋喃西林10mg和盐酸麻黄碱500mg对照品，置50ml量瓶中，加入相应量的附加成分，加水适量使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml置50ml量瓶中，加水至刻度摇匀，参照“2．1”项下条件进行测定。
3．5 样品测定
精密吸取呋麻滴鼻液5.0ml置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，进样20μl，记录呋喃西林和盐酸麻黄碱的峰面积，根据标准曲线计算呋喃西林和盐酸麻黄碱的浓度，并计算两者的含量，同时与规范法测定结果进行比较。
2 讨论
2．1 流动相配比的影响
本文选用乙腈：0.05mol/L的磷酸二氢钾(22：78)作为流动相，并考察了流动相中乙腈的加入量对主药保留时间及色谱分离的影响。结果发现，当乙腈量增加时，虽然不影响呋喃西林与盐酸麻黄碱的分离，但呋喃西林与其杂质峰分离效果下降，并且呋喃西林与盐酸麻黄碱的保留时间逐渐增加。
2．2 本文采用乙腈：0.05mol/L磷酸二钾溶液(22：78)为流动相时分离效果较好，曾有高效液相色谱法 测定呋麻滴鼻液的报道，该法流动相用甲醇：0.05％三乙胺水溶液，且用磷酸调pH为2.5，在流动相酸性过强的情况下会损坏色谱柱，从而影响柱子的寿命。
2．3 用本法和规范法对样品含量测定进行比较，结果无显著性差异(P>0.01)。
参考文献
l 中国医院制剂规范-西药制剂[s]．第2版．北京：中国医药科技出版社、1994．165．166
2 丁春根，王雪梅．双波长法测定呋喃西林麻黄碱滴鼻液的含量[J]．中国医院药学杂志．1987，7(10)：455-456