双黄连口服液含量测定方法

    双黄连口服液处方为：金银花375g，黄芩375g，连翘750g。
    2005《中国药典》双黄连口服液含量测定项下：
    黄芩
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）为流动相；检测波长为274nm。理论板数按黄芩苷峰计应不低于1500。
    供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20分钟，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
    金银花
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（20：80：1）为流动相；检测波长为324nm。理论板数按绿原酸峰计应不低于6000。
    供试品溶液的制备：精密量取本品2ml，置50ml棕色量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
    连翘
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相；检测波长为278nm。理论板数按连翘苷峰计应不低于6000。
    供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置中性氧化铝柱（100～120目，6g，内径1cm）上，用70%乙醇40ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣加50%甲醇适量，温热使溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。
    文献报道的以黄芩苷为指标的，如：刘秀省等用HPLC法双黄连口服液中黄芩苷的含量，采用日本岛津LC-10A液相色谱仪，色谱柱为VP-ODS，柱温为室温，检测波长为277nm，流动相为甲醇-水-冰醋酸（48：52：1）。
    以绿原酸为指标的，如：李应芬采用HPLC法测定双黄连口服液中绿原酸的含量，采用Waters高效液相色谱仪，色谱柱用Hypersil ODS2 C18 柱( 4.6mm×200mm,5μm)，流动相为甲醇-0.4 %磷酸溶液(24：76)，检测波长327nm，柱温30℃。样品用50%甲醇超声处理，结果平均回收率为99.0%，RSD=1.3（n=5）。
    以连翘苷为指标的，如：张雪光等采用HPLC法测定双黄连口服液中连翘苷的含量，采用Ｓｈｉｍａｄｚｕ公司高效液相色谱仪ＬＣ－１０Ａ系列，色谱柱为ＶｒｄｍａｓｉｌＣ１８ 柱（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为乙腈-水（２５：７５），检测波长２７７ｎｍ，流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ。
    同时测定多种成分的，如：方崇波用HPLC法测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量，采用HP1100高效液相色谱仪，色谱柱为LUNA C18 (2),4.6mm×150.0 mm,5μm，流动相为0.1%磷酸溶液-乙腈：0min (88：12)，10min (74：26)，流速1.0mL/min，检测波长318nm。绿原酸线性范围为0.256 8～2.054 4μg，平均回收率97.7 %，RSD =0.8%，黄芩苷线性范围0.9896～7.9168μg，平均回收率98.0 %，RSD=0.9%。
    吕元琦等用毛细管电泳法测定双黄连口服液中黄芩甙元、黄芩甙、绿原酸和咖啡酸的含量，采用1229 高效毛细管电泳仪，配有固定波长紫外检测器，检测波长214nm，未涂层弹性石英毛细管柱(55cm×50μm)，分离电压12 kV，静压力进样(高度10cm, 时间8s)，背景电解质为20mmol/ L硼砂缓冲溶液(用0.2mol/ L HAc和0.1mol/ L NaOH调pH9.0)。样品用50 %(φ)乙醇- 20mmol/ L 硼砂缓冲溶液(pH 9.0) 稀释，使用前用0.45μm醋酸纤维滤膜过滤。