摘要 目的：建立大花红景天中红景天苷、没食子酸的含量测定方法。方法：采用YWG-C18柱分离测定；甲醇-四氢呋喃-冰乙酸-水(0.1：0.5：2：97.4)为流动相；检测波长：270 nm；流速：0.8mL/min。结果：红景天苷在0.30～1.50μg，没食子酸在0.22～1.10μg范围内呈良好的线性关系，r=0.9994，r=0.9996，平均回收率分别为97.3％ ，RSD=2.0％；98.7％，RSD=2.3％．结论：本方法快捷、简便，结果准确、可靠，可做为红景天类药材有效成分的测定方法。
关键词：大花红景天；红景天苷；没食子酸；高效液相色谱法
藏药红景天素有“高原人参”之称，具有抗衰老、抗疲劳、抗
肿瘤等作用。但其种类较为复杂，质量良莠不齐，而其中大花红景天[Rhodiola crenulata(Hook．F.et Thorns．)H．obba]已收人中华人民共和国卫生部藏药标准。甘肃奇正藏药集团公司在西藏林芝地区引种栽培了大花红景天，为此，对其有效成分进行含量测定已成为科学评价栽培红景天的质量，利用、开发红景天资源的关键问题。目前，研究者已从红景天属植物中分离出苷类、有机酸类、多糖类、黄酮类等多种有效成分并采用比色法、薄层色谱法、高效液相色谱法对红景天的主要有效成分红景天苷进行了含量测定。考虑到
中药材有效成分的协同作用，我们采用高效液相色谱法对野生品
与栽培品中苷类的代表成分红景天苷及有机酸的有效成分没食子酸同时进行含量测定，认为栽培品可作大花红景天使用。
1 仪器与试药
LC-10AVP系列高效液相色谱仪(日本岛津)；Tu-1800SPC紫外分光光度计(北京普析通用)；红景天苷对照品、没食子酸对照品(中国药品生物制品检定所提供)；大花红景天药材I、Ⅱ、Ⅲ[Rhodio—la crenulata(Hook．f．et Thoms．)H．obba](甘肃奇正藏药集团公司提供，甘肃省药品
检验所宋玉成副主任药师鉴定)；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，四氢呋喃、冰乙酸为分析纯。
2 色谱条件
YWG-Cl8色谱柱(250mm×4.6mm，10μm，大连化学物理研究所)；流动相：甲醇-四氢呋喃-冰乙酸-水(0.1：0.5：2：97.4)；流速：0.8 mL/min；检测波长：270nm。
3 实验方法
3．1 对照品溶液精密称取减压干燥至恒重的红景天苷对照品、没食子酸对照品，加甲醇制成0.15mg/mL(红景天苷)和0.11mg/mL(没食子酸)的混合对照品溶液。
3．2 供试品溶液取本品粉碎，过3号筛，混匀、精密称取0.5g，置25mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理1h，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液5mL置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，滤液作为供试品溶液。
3．3 线性关系考察精密吸取对照品溶液2，4，6，8，10μL，分别注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积值(A)为横坐标，红景天苷量(C红)、没食子酸量(C酸)为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程为：C红=2.007×0.000001A 一4.038×0.001。r红=0.9994，
C酸=1.329×0.000001A一2.236×0.01。 r酸=0.9996。
表明红景天苷在0.30—1.50μg，没食子酸在0.22—1.10μg范围内呈良好的线性关系。
3．4 精密度试验分别精密吸取对照品溶液各10μl，重复进样5次，结果红景天苷RSD为0.7％，没食子酸RSD为1.0％ 。
3．5 重复性试验分别精密称取I号样品0.5 g，按供试品溶液的制备方法制备5份，进样，测定，样品测定结果红景天苷平均值为7.83 mg/g，RSD为0.5％；没食子酸平均值为11.64mg/g，RSD为0.8％。
3．6 回收率试验采用加样回收法，精密称取已知含量的大花红景天(I号样品)5份，分别精密加入一定量的红景天苷(1.34mg/mL)、没食子酸(0.87mg/mL)对照品，按供试品溶液的制备方法制备，进样，计算回收率。
4 样品测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以外标法计算样品中红景天苷、没食子酸的含量。
5 讨论
5．1 检测波长的选择 红景天苷对照品溶液和没食子酸对照品溶液在200—4O0 nm范围内进行扫描，结果在220及270nm附近均有最大吸收。选择270 nm为检测波长，杂质干扰少。
5.2 提取方法及提取时间的选择
5.3 流动相的选择 曾用甲醇-水（10：90），甲醇-水（20：80），乙腈-甲醇-水系列为流动相，分离效果均不理想，且没食子酸出峰时间太早，导致与杂志峰重叠。经实验摸索，降低甲醇在流动相的比例，加入四氢呋喃、冰乙酸，可推迟没食子酸出峰时间并与红景天苷达到良好分离。
作者：
2007-5-18