摘要：目的建立益气健脾口服液的专属性含量测定方法。方法采用HPLC法，色谱柱为Kromasil C18柱，流动相为甲醇-醋酸-水(35：4：61)，检测波长283nm。结果橙皮苷在进样量为0.104～5.200μg范围内呈良好的线性关系；平均加样回收率为99.58％，RSD=1.04％(n=6)。结论所用方法操作简便易行、准确可靠，可用于益气健脾口服液的质量控制。
关健词：益气健脾口服液；橙皮苷；HPLC
益气健脾口服液是由黑蚂蚁、鸡矢藤、陈皮、山楂、麦芽、六神曲、槟榔等
中药经提取加工而成的口服液体
制剂，具有益气补虚、健脾导滞和开胃消食之功效，用于小儿消化不良、食欲不振、饮食积滞、身体瘦弱、厌食和疳积等疾病的治疗。现采用HPLC法测定益气健脾口服液中橙皮苷的含量，以此作为其质量控制的指标。
1 实验部分
1．1 仪器、试剂与样品
Waters 515泵，Waters 2487紫外检测器，Waters 717plus自动进样器，Waters PCM泵控箱和WatersTCM温控箱及柱温箱(美国Waters公司)；MilliPORE纯水器(美国密里博公司)。橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号：0721—9909，供含量测定用)；甲醇为色谱纯；水为高纯水；其他试剂为分析纯。益气健脾口服液样品及缺陈皮的阴性对照样品(广西半宙制药股份有限公司)：
1．2 方法与结果
1．2．1 色谱条件 Kromasil cl8色谱柱(5μm，4.6mmx250mm)，柱温35℃。理论板数在5 x l000以上，进样量l0μl。在以上色谱条件下，橙皮苷保留时间约为15.6min。
1．2．2 溶液的制备精密量取口服液3ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成1mg/ml的溶液，摇匀，作为对照品溶液。
1．2．3 线性关系的考察 精密吸取上述对照品溶液0.1、0.5、1.0、3.0、5.0ml，分别置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，进样测定。以对照品进样量为纵坐标，峰面积为横坐标绘制标准曲线，结果橙皮苷进样量在0.104～5.200μg范围内呈良好的线性关系，其回归方程为：Y=1.567×1000000X+9.010×lO000(r=0.9997)。
1．2．4 稳定性的考察 对同一批供试品溶液，12h内每隔2h测定1次，结果每支平均含量为2.593mg，RSD=1.12％，表明供试品溶液稳定性良好。
1．2．5 加样回收率测定精密量取口服液(批号：01 1208，含量0.2508mg/ml)2ml，置10ml量瓶中，精密加入对照品0.4220mg(取浓度为0.211mg/ml 的橙皮苷对照品甲醇溶液，精密加入2m1)，加甲醇稀释至刻度，摇匀，按“1．2．6”项下方法测定含量，再计算回收率。
1．2．6 样品的测定和方法精密度(重复性)考察10批样品按照“I．2．2”项下方法制备供试品溶液，进样测定，用峰面积按外标法计算含量。
2 讨论
取益气健脾口服液，适当稀释后，在200～4O0nm范围内扫描，其最大的吸收在283.2nm，与药典规定的测定波长283nm相近，故采用283nm作为测定波长。在此波长下，阴性样品色谱图表明，空白样品对橙皮苷测定无干扰。由于橙皮苷在甲酰胺中的溶解度比在甲醇中大，曾参考文献，取益气健脾口服液用水饱和的正丁醇提取4次，蒸干正丁醇液后，用甲酰胺溶解，以甲醇-水(39：61)作流动相，于283nm测定。但发现甲酰胺对色谱柱损害较大，理论板数下降较快，影响分离效果，经试验，采用甲醇直接稀释、过滤后测定的方法，比用正丁醇提取，不仅操作方便，而且结果更准确。虽然用甲醇直接溶解会带进较多水溶性杂质，但不会对色谱柱造成损害。所用方法测定橙皮苷的含量，简便、快速、准确，可用作益气健脾口服液的含量控制。
参考文献：
1] 中华人民共和国国家药典委员会．中国药典[S]．一部．北京：化学工业出版社，2000．148
2] 谢东，冯枫、陆敏仪．厌食康颗粒质量控制方法的研究[J]．中国药师，2000，3(4)：22
作者：
2007-5-18