摘要：目的 建立高效液相色谱法测定复方氧氟沙星滴鼻液中盐酸麻黄碱和氧氟沙星含量的方法。方法：色谱条件采用Diamosil-C18柱，以0.05 mol/L枸橼酸溶液-乙腈(8O：20)(三乙胺调节pH为4.O)为流动相；流速0.8mL/min；检测波长257nm。结果盐酸麻黄碱和氧氟沙星线性范围分别为202.5O～1215.36、59.63～357.80μg/mL ；其回归方程分别为A=777.24C一13613.33(r=0.999 7)；A=32555.32C+20200.0 (r=0.9997)；平均回收率分别为99.8%、99.5%；RSD分别为1.9%(n=9)、1.6%(n=9)。结论方法操作简单、准确，可用于复方氧氟沙星滴鼻液的质量控制。
关键词：盐酸麻黄碱；氧氟沙星；高效液相色谱法；含量测定
复方氧氟沙星滴鼻液为《药物新
制剂手册》中收载品种，用于治疗急性
鼻炎，慢性单纯性鼻炎，急性副
鼻窦炎等。其处方为盐酸麻黄碱10g，氧氟沙星3g，氯化钠5.5g，羟苯乙酯0.3 g，纯化水加至1000 mL。该手册中采用旋光法和紫外分光光度法分别测定盐酸麻黄碱和氧氟沙星的含量。有关文献报道其含量测定方法有导数分光光度法，紫外分光光度法及旋光法嘲。本实验采用HPLC法同时测定该制剂中盐酸麻黄碱和氧氟沙星的含量，本法操作简单、结果准确、重现性好。
1 仪器与试药
1．1 仪器
岛津UV-2550紫外分光光度计；LC—IOATvp液相色谱仪；SPD-lOAvp紫外检测器；WDL-95色谱工作站；WZZ-1全自动旋光仪。
1．2 试药
盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号：0714—9903，供含量测定用)；氧氟沙星对照品(中国药品生物制品检定所，批号：130454—200202，含量98.6%)；复方氧氟沙星滴鼻液(湘西自治州人民医院提供，批号：
20031104，20031105，20031106)；乙腈、甲醇均为色谱纯；水为重蒸水；其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2．1 对照品溶液的制备
盐酸麻黄碱储备液I：取105℃干燥至恒重的盐酸麻黄碱对照品0.1266g，置5OmL量瓶中，加水振摇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(2.532mg/mL)。氧氟沙星储备液Ⅱ：取105℃干燥至恒重的氧氟沙星对照品(含量98.6 %)0.0378 g，置5OmL量瓶中，加0.1mol/L 盐酸液振摇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。(O.7454mg/mL)精密量取储备液I、Ⅱ各8.0mL，置25mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀即得混合对照品溶液。
2．2 供试品溶液的制备
精密量取复方氧氟沙星滴鼻液2.0mL，置25mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。
2．3 色谱条件与系统适用性
色谱柱：Diamosil—C18(200mmX4.6mm．5μm)；流动相：0.05mol/L枸橼酸溶液-乙腈(80：20)(用三乙胺调节pH=4.O)，流速：0.8mL/min；检测波长：257nm；柱温：室温，进样量：2OμL。采用峰面积外标法计算含量，理论塔板数均>3000，两峰的分离度>7.0。
2．4 干扰成分考察
按处方比例，制备不含盐酸麻黄碱和氧氟沙星的阴性样品，按“2．2”项下方法制成阴性溶液。按上述条件测定，结果表明，结果盐酸麻黄碱的tR为4.55min，氧氟沙星的tR为7.63min，而阴性溶液色谱图中无峰出现，说明阴性溶液对含量测定无干扰。
2．5 线性关系的考察
分别精密量取储备液I、Ⅱ各0.8、1.6、2.4、3.2、4.0、4.8mL置6个l0mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别取2OμL，进样，测定，以各组分的峰面积积分值为纵坐标，浓度为横坐标，进行线性回归，得盐酸麻黄碱与氧氟沙星回归方程分别为：A=777.24C一13613.33，r=O.9997；A=32533.32C+20200.0，r=O.9997。
结果表明，盐酸麻黄碱在202.5O～1215.36μg/mL线性关系良好，氧氟沙星在59.63～357.80μg/mL线性关系良好。
2．6 精密度试验
精密量取混合对照品溶液2OμL，重复进样7次，记录峰面积积分值，结果盐酸麻黄碱RSD=1.5%，氧氟沙星
RSD=0.9 %。表明精密度良好。
2．7 稳定性试验
分别精密量取同一份供试品溶液(批号：20031104)20止，在8h内每隔1h进样，分别测定其峰面积积分值，盐酸麻黄碱RSD=1.5%，氧氟沙星RSD=0.94%。结果表明，供试品溶液在8 h内稳定。
2．8 重复性试验
取同一批号(20031104)的供试品溶液5份(n=2)，按上述条件进行测定，结果：盐酸麻黄碱RSD=1.4%，氧氟沙星RSD=O.57%。
2．9 加样回收率试验
精密量取已知含量的样品1.0mL共9份，分置25mL量瓶中，分别精密加入一定量的盐酸麻黄碱对照品和氧氟沙星对照品，加流动相稀释至刻度，摇匀，按“2．10”项下方法进行含量测定，计算加样回收率，结果盐酸麻黄碱平均回收率为99.8%，RSD 为1.9%，氧氟沙星平均回收率99.5%，RSD为1.6%。
2．10 样品测定
取3批样品，按“2．2”项下操作，在上述色谱条件下，分别精密量取混合对照品溶液与供试品溶液各2OμL，进样，测定。计算两组分的含量。
3 讨论
在200～350nm范围内分别对盐酸麻黄碱溶液(1mg/mL)和氧氟沙星溶液(6g/mL)进行紫外扫描，结果两组分的最大吸收波长、紫外吸收强度相差较大，盐酸麻黄碱溶液的最大吸收波长为257nm；氧氟沙星溶液最大吸收波长为294 nm，在257nm波长处也有吸收。
由于盐酸麻黄碱的百分吸收系数较小，为提高检测的灵敏度，故选用257nm为检测波长。曾比较过0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇(53：47)、甲醇-0.13 mol/L 醋酸铵溶液(用磷酸调pH=6.0)(52：48)和0.05mol/L枸橼酸溶液-乙腈(8O：2O)(三乙胺调节pH值-4.O)。结果枸橼酸溶液-乙腈(8O：20)的分离度好，柱效较高，柱压较低。同时采用《药物新制剂手册》中的方法对该制剂中两组分进行含量测定，结果显示其含量与HPLC法所测定的含量无显著性差异，且HPLC法具有同时分离分析的优点，更适用于质量控制。
参考文献
[1] 张辉，董福祥，王爱凤，等．药物新制剂手册[M]．郑州：河南科学技术出版社，2001．304
[2] 黄建楷．氧麻滴鼻剂的导数分光光度法测定[J]．中国医院
药学杂志，1998，18(6)：267
作者：
2007-5-18