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摘要 目的:建立高效液相色谱法测定萘丁美酮含量的方法。方法:色谱柱:Spherisorb
SiO2,流动相:1,4-二氧六环-环己烷(1∶30),内标物:β-萘酚,检测波长:254
nm。结果:萘丁美酮的线性范围0.1~1.3
mg.mL-1,r=0.999
4,回收率为100.3%,RSD=0.26%。结论:方法准确、快速、简便。 The Determination of Nabumetone by HPLC Xiong Fagao,Wang
Ruoyue,Liu Kai Abstract Objective:To
develop a HPLC method for the determination of
nabumetone.Methods:Spherisorb SiO2 column(5.0 mm×150 mm,5
μm,Dalian Elite Co.)was used with a mobile phase of 1,4-dioxane and
cyclohexane(1∶30),β-naphthol was used as internal standard,and UV detector
at 254nm.Results:The linear range of nabumetone was 0.1~1.3
mg.mL-1,r=0.999 4.The recovery rate
was 100.3%,RSD=0.26%.Conclusion:This method is accurate,rapid and sample
for the determination of nabumetone. 萘丁美酮(Nabumetone)为新一代非类固醇解热、镇痛、抗炎药,主要用于风湿性、类风湿性关节炎和骨关节炎的治疗[1]。目前,国内外对萘丁美酮含量的测定方法主要有羟胺法[2]、紫外分光光度法[3]、高效液相色谱法[4],也有气相色谱法[5]和重量法[6]的报道。BP 1993 Add 1996开始收载萘丁美酮质量标准,采用高效液相色谱法外标法测定萘丁美酮的含量及有关杂质;本文所述高效液相色谱法,分离效果好而且准确,结果令人满意。 1 仪器与试药 Shimadzu LC-9A高效液相色谱仪,Shimadzu
SPD-6AV紫外检测器,Shimadzu
C-R4A色谱积分仪,CQ-1K超声波清洗器(上海超声波仪器厂)。 2 色谱条件 Spherisorb硅胶不锈钢液相色谱柱(5.0 mm×150 mm,5 μm,大连依利特公司),流动相:1,4-二氧六环-环己烷(1∶30),流速:1.2 mL*min-1,检测波长:254 nm,内标物:β-萘酚。 3 内标物的选择与精制 在既定条件下,分别试用萘、α-萘酚、β-萘酚作内标,结果β-萘酚保留时间(12
min)合适,与样品中各峰有良好的分离,故选作内标物。因市售的β-萘酚杂质较多,需对β-萘酚进行精制,精制方法如下[7,8]: 4 萘丁美酮对照品的制备和纯度检查 取萘丁美酮(含量大于99.0%)适量,用无水乙醇反复精制,60 ℃减压干燥至恒重,照薄层色谱法[9],以硅胶G为固定相,用甲苯-醋酸乙酯-正己烷(7∶2∶5)为展开剂,展开后晾干,在105 ℃干燥10 min,放冷,喷以10%硫酸乙醇溶液,再在105 ℃干燥10 min后,在365 nm紫外灯下检视,不得有杂质斑点。 5 线性关系考察 精密称取萘丁美酮的对照品0.5 g置于100
mL量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,即得对照品溶液。 6 回收率的测定 精密称取萘丁美酮对照品约40 mg共5份于50 mL量瓶中,分别加入内标溶液5 mL,用流动相溶解并稀释至刻度,混匀后进样,测定萘丁美酮的含量,计算回收率,测得萘丁美酮的平均回收率为100.3%,RSD=0.35%,n=5。 7 方法的精密度 精密称取对照品约40 mg至50 mL量瓶中,加内标溶液5 mL,用流动相溶解并稀释至刻度,混匀,平行进样5次,计算精密度,结果含量的RSD=0.26%,n=5。 8 样品的测定 精密称取样品及对照品各约40 mg,分别置于50 mL量瓶中,分别精密加入内标溶液5 mL,用流动相溶解并稀释至刻度,取各溶液20 μL进样,记录色谱图,计算萘丁美酮含量,并与BP 1993 Add 1996法、卫生部部标羟胺法及紫外分光光度法比较,结果见表1。色谱图见图1。 表1 样品测定结果(%,n=3) |
批号 | 本法 | BP 1993 Add 1996 | 羟胺法 |
UV法 |
9805048
9805052 |
99.39 99.81 99.49 99.25 99.26 97.57 |
99.49 100.88 100.00 99.32 100.41 97.66 |
99.48 99.66 99.72 99.66 99.56 99.16 |
100.95 100.40 99.75 100.04 100.37 101.41 |
图1 以本法不加内标(A)、加内标(B)及BP 1993 9 讨论 采用经典的羟胺法测定萘丁美酮的含量时,由于滴定终点颜色变化不明显,终点不易判断,而萘丁美酮又无其它可用于经典容量分析的官能团,故卫生部药品标准WS-394(X-340)-95(试行)采用紫外分光光度法测定含量,但是样品中存在萘、双酮等生产过程中带来的杂质,在262
nm波长处也有吸收,仍影响测定结果;BP 1993 Add
1996采用HPLC外标法测定萘丁美酮的含量,但是流动相中1,2-二氯乙烷毒性较大,且对有些杂质的分离效果欠佳;为此,作者曾采用反相高效液相色谱法,以甲醇-水(1∶1)为流动相对萘丁美酮进行分离,但未能将杂质有效分离;本文所述高效液相色谱法克服了以上各种缺陷,流动相毒性小,对杂质具有良好的分离,效果较为理想,见图1;该法重现性、回收率好,方法可行且操作简便,也可用于有关杂质的检验。 |
图2 样品(9806066)的中间体(A)、 刘凯:沈阳药科大学98届毕业生 参考文献 1,王泽民,康葵,冯梅等.当代结构药物全集.第一版.北京:北京科学技术出版社,1993.1100 (本文于1999年3月9日收到) |