高效液相色谱法测定蒿甲醚胶囊的含量

摘要　目的：建立测定蒿甲醚胶囊中蒿甲醚含量的高效液相色谱法。方法：选用ODS分析柱，流动相：水-乙腈(45∶55)，检测波长：210 nm,流速：1.0 mL^．min^-1，柱温：室温，外标法定量。结果：本法简便、准确、快速。线性范围：50～250 μg(r=0.999 8)。平均回收率为100.8%，RSD=1.5%(n=6)。结论：建立的方法利于蒿甲醚胶囊的质量控制。
关键词　高效液相色谱　蒿甲醚胶囊　蒿甲醚

Determination of Artemether in Artemether Capsules by HPLC

Wang Ziyou
(Kunming Pharmaceutical Corp,Kunming　650100)
Chen Zufen
(Yunnan Institute for Drug Control，Kunming　650011)

Abstract　Objective：To establish HPLC method for the determination of artemether in artemether capsules.Methods:PUROSPHER(Merck)C₁₈ column(4.0 mm×125 mm,5 μm),with the mobile phase consisted of warter-acetonitrile(45∶55),detection wavelength at 210 nm and external standard method.Results:The average recovery of artemether was 100.8%,with RSD of 1.5%(n=6).Conclusion:The method is simple,rapid and the results is accurate and reliable.
Key words　HPLC,artemether capsules,artemether

　　蒿甲醚胶囊是新一代具有特效的抗疟药和血吸虫病预防药，在部颁标准中胶囊的含量测定采用紫外分光光度法^［1］。本文用高效液相色谱外标法直接测定其含量，使检测准确、快速、简便，专属性提高，利于更好地控制产品质量。进一步完善标准。

1　试药与仪器

　　蒿甲醚对照品(含量99.8%)，蒿甲醚胶囊(每粒40 mg)均由昆明制药股份有限公司提供。Waters高效液相色谱仪，乙腈为色谱级，超纯水自制。

2　色谱条件

　　以PUROSPHER填充RP-18(Merck)，5 μm,4 mm×125 mm色谱分析柱，流动相：乙腈-水(55∶45)，检测波长：210 nm，流速：1.0 mL^.min^-1，柱温：室温，理论塔板数以蒿甲醚计不低于2 000。

3　实验方法

3.1　线性关系　准确配制每1 mL含蒿甲醚4 mg的流动相溶液，再分别精密量取一定量加流动相稀释制成系列梯度(2.5～12.5 mg^.mL^-1)的溶液，进样量20 μL，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：
Y=2.06×10⁴X+0.9×10⁴　　r=0.999 8
蒿甲醚峰面积与进样量之间有良好的线性关系，线性范围在50～250 μg之间。
3.2　进样重现性与稳定性试验　取“样品测定”项下的每1 mL含蒿甲醚4 mg的对照品溶液，重复进样6次，每次进样20 μL，按上述色谱条件测定峰面积，RSD=0.62%。经放置24 h后测定，其峰面积基本一致，无杂质峰产生。
3.3　干扰性试验　按处方称取除主药外的各组分，按样品测定方法同法处理，试验结果表明在蒿甲醚峰保留时间处无峰出现，即辅料无干扰。色谱图见图1。

图1　蒿甲醚对照品(A)、蒿甲醚胶囊(B)及
胶囊辅料(C)的色谱图
1.蒿甲醚

3.4　加样回收率试验　精密称取蒿甲醚对照品500 mg，置25 mL量瓶中，加流动相溶解完全并稀释至刻度、摇匀即得对照品溶液。精密称取已知含量的同一批样品的内容物适量(相当于蒿甲醚100 mg)共6份，分别置25 mL量瓶中，精密加入对照品溶液5.0 mL,用流动相溶解并稀释至刻度，照“样品测定”项下的方法，分别测定蒿甲醚峰面积，计算得平均回收率为100.8%，RSD为1.5%(n=6)。
3.5　样品含量测定　取本品10粒精密称定，倾出内容物，研匀，精密称取适量(相当于蒿甲醚100 mg)置25 mL量瓶中，加流动相超声溶解，滤过，续滤液作样品溶液。另取蒿甲醚对照品加流动相溶解制成4 mg^.mL^-1的溶液作对照品溶液，按上述色谱条件，分别进样20 μL，按外标法计算其标示含量，结果与部颁标准(UV)法^［1］比较，见表1。试验结果表明，2法测定结果基本相符。

表1　本法与部颁标准法含量测定结果(%，n=3)

4.1　通过实验表明高效液相色谱法测定蒿甲醚胶囊含量较部颁标准既简化了操作，缩短试验周期，又能直接采用色谱峰面积定量，结果准确，提高专属性。
4.2　本实验经方法学考察表明蒿甲醚胶囊中其他组分对主药测定无干扰，其精密性、重现性均好，回收率好，结果较满意，且测定结果能更真实地反映主药蒿甲醚的含量。使蒿甲醚胶囊的质量检测更趋全面和完善。
4.3　实验中所需蒿甲醚对照品因含水低(小于0.5%)，经实验证明，未经五氧化二磷干燥过夜完全能达到标准要求。

王子幼（昆明制药股份有限公司　昆明　650100）
陈祖芬（云南省药品检验所　昆明　650011）

参考文献

1，中华人民共和国卫生部部颁标准.WS₁-（X-119)-96Z

(本文于1999年4月5日收到)