HPLC测定强精宝口服液中淫羊藿甙的含量

　　强精宝口服液是由黄芪、人参、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、韭菜籽、鹿肾、黄狗肾、驴肾、鹿茸、龟甲胶等十几味天然药物精制而成。具有补肾壮阳、益气填精补髓、强筋壮骨等功效，用于强健身体，补肾壮阳、腰膝酸痛乏力。原质量标准中无定量指标，本文采用RP-HPLC，用外标峰面积法测定该制剂中有效成份淫羊藿甙的含量，结果表明，本法可作为监测和控制该制剂质量指标的手段。

1　实验材料

1.1　仪器：Waters高效液相色谱仪(美国)；510泵(美国)；490型紫外检测器(美国)；745型分析仪；Milli-Q Reageat Water Syetem(日本产);U6c手动进样器。
1.2　试药：淫羊藿标准品(中国药品生物制品检定所，批号737-8802)；强精宝口服液(内蒙古蒙药厂)；乙腈、甲醇均为色谱纯；超纯水自制。
1.3　色谱条件：μ-Bomdapak C₁₈色谱柱，流动相为乙腈-水(7∶3),流速1.0ml/min,柱温30℃,检测波长270nm,AUFS为0.5,进样量10μl。淫羊藿甙的保留时间为2.45min,数据处理为外标峰面积法，色谱图见附图。

附图　HPLC色谱图
A-淫羊藿标准色谱图；B-强精宝口服液色谱图；1-淫羊藿甙峰；2，3-未知物峰

2　标准曲线的制备

2.1　标准溶液的配制：精密称取淫羊藿甙2.75mg,加甲醇溶解并稀释至25ml,摇匀，即得浓度为0.11mg/ml的标准溶液。
2.2　标准曲线的绘制：在上述色谱条件下，分别进标准溶液8,10,14,20和30μl进行分析，测得各峰面积，计算淫羊藿甙量(W)与峰面积(A)在0.88～3.3μg范围内的线性关系。回归方程:W=9.1759×10^-5A+0.01737,r=0.9999。
2.3　系统适用性试验：取上述标准品溶液10μl进样测定，计算结果理论板数为2075。
2.4　精密度试验：连续测定淫羊藿甙标准溶液10μl 5次，RSD为2.1%。

3　淫羊藿甙含量的测定

3.1　样品溶液的制备：精密吸取样品15ml,加氯仿洗涤3次，每次15ml,弃去氯仿层后，加入水饱和正丁醇萃取4次，每次15ml,合并正丁醇，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解，并定量溶解于25ml量瓶中,0.45μm滤膜过滤，取其续滤液为样品溶液。
3.2　样品的测定：精密吸取样品溶液10μl,在上述色谱条件下进行分析，测定淫羊藿甙的峰面积，用外标峰面积法计算淫羊藿甙的含量，每批测定3份，结果见表1。

表1　强精宝口服液中淫羊藿甙的含量

表2　加样回收率