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蒲公英含量测定方法(咖啡酸)

来源:药物分析网
摘要:蒲公英为菊科植物蒲公英TaraxacummongolicumHand。、碱地蒲公英taraxacumsinicumKitag。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定咖啡酸的含量,有关蒲公英及其制剂中咖啡酸的含量测定方法主要有高效液相色谱法和毛细管电泳法等。一、高效液相色谱法2005版《中国药典》蒲公英含量测定项下:色谱条件与系统适用......

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    蒲公英为菊科植物蒲公英Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.、碱地蒲公英taraxacum sinicumKitag.或同属数种植物的干燥全草。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定咖啡酸的含量,有关蒲公英及其制剂中咖啡酸的含量测定方法主要有高效液相色谱法和毛细管电泳法等。
    一、高效液相色谱法
    2005版《中国药典》蒲公英含量测定项下:
    色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠1.56g,加水使溶解成1000ml,再加1%磷酸溶液调节pH值至3.8~4.0,即得)(23:77)为流动相;检测波长为323nm。柱温40℃。理论板数按咖啡酸峰计算应不得低于3000。
    供试品溶液的制备:取本品粗粉约1g,精密称定,置50ml具塞锥形瓶中,精密加5%甲酸的甲醇溶液10ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)30分钟,取出,放冷,再称定重量,用5%甲酸的甲醇溶液补足减失的重量,摇匀,离心,取上清液,置棕色量瓶中,即得。
    文献报道的HPLC法,一般采用甲醇-磷酸盐缓冲液系统为流动相,样品提取溶剂同药典。常见的实验条件为:
    ①美国HP1090M型高效液相色谱仪,色谱柱为Hylpersil C18柱,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(pH=4.2)(23:77),检测波长为323nm,柱温为40℃。(凌云,“中药蒲公英的质量标准研究”,中草药,1999,30(12))
    ②色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱4.6mm×150mm,流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液( pH=4.2 )(23∶77),检测波长323nm。(李文琪,“高效液相色谱法测定蒲公英片中绿原酸和咖啡酸的含量” 安徽医药,2005,9(10))
    ③高效液相色谱仪(日本岛津);十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(23:77);检测波长323nm。(魏云兰,“HPLC法测定炎灵口服液中咖啡酸的含量”,ITCM.March,2004,21(2))
    ④美国Waters公司515型高效液相色谱仪;色谱柱为Nucleosil C18 ( 200mm×4.6mm,粒径10 μm) ,大连化学物理研究所;流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(21:79) ,梯度洗脱;检测波长323nm;柱温:40℃。(张爱华,“HPLC法测定蒲公英及保肝奶蓟草胶囊中咖啡酸的含量”,南京中医药大学学报(自然科学版),2002,18(5))
    晏媛等采用RP-HPLC方法,Hypersil BDS C18分析柱(5μm ,250mm×4.6mm) 对蒲公英的乙酸乙酯部位进行指纹图谱定性分析,并对有效成分咖啡酸进行定量测定。流动相A为乙腈,流动相B为磷酸盐缓冲液(磷酸调pH为3.7);梯度洗脱时间为0、38、40min 时,A(%)分别为5%、75 %、75%;柱温35℃;流速0.7ml/min;检测波长323nm。蒲公英药材用75%乙醇渗漉提取,渗漉液依次用石油醚、醋酸乙酯萃取,醋酸乙酯液蒸干后残渣用甲醇溶解。

    二、高效毛细管电泳法
    晏媛等采用高效毛细管电泳法对妇洁灌肠液及蒲公英原药材中所含咖啡酸进行含量测定。采用Water公司高效毛细管电泳仪;石英毛细管(75μm×60cm, Water公司)。分离条件:分离电压为12kV,极性为正极到负极;紫外检测波长313nm;运行缓冲液为20mmol/L硼砂溶液(四硼酸钠1.907g于25℃时溶于水并定容至250ml即得)pH=9.18,25℃时以pH计测定。每次进样前,均用0.1mol/L氢氧化钠溶液冲洗1min,纯水冲洗2min,最后用运行缓冲液冲洗毛细管柱3min,每次分析后用0.1mol/L氢氧化钠溶液冲洗10min,水冲洗10min。蒲公英药材用95%乙醇渗漉提取,渗漉液用醋酸乙酯萃取;妇洁灌肠液用醋酸乙酯直接萃取。毛细管电泳法精密度、准确性均较好,具简便、经济、快速的特点,可作为蒲公英及妇洁灌肠液中蒲公英质量鉴定的一种方法。

作者: 2007-5-25
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