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徐长卿含量测定方法(丹皮酚)

来源:药物分析网
摘要:徐长卿为萝摩科植物徐长卿Cynanchunpaniculatum(Bge。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法,以丹皮酚为对照,测定其含量。文献报道的含量程度方法主要有高效液相色谱法、薄层扫描法等。一、高效液相色谱法2005版《中国药典》徐长卿含量测定项下:色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。...

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    徐长卿为萝摩科植物徐长卿Cynanchun paniculatum(Bge.) Kitag.的干燥根及根茎。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法,以丹皮酚为对照,测定其含量。文献报道的含量程度方法主要有高效液相色谱法、薄层扫描法等。
    一、高效液相色谱法
    2005版《中国药典》徐长卿含量测定项下:
    色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(45:55)为流动相,检测波长为274nm;理论板数按丹皮酚峰计算应不低于3000。
    供试品溶液的制备:取本品粗粉约0.5克,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇50ml,称定重量,超声处理(功率250W,频率33kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液1ml,至10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
    文献报道的方法,流动相系统长为甲醇-水系统,采用的实验条件总结如下:
    ①Waters 高效液相色谱仪,Waters 2487 型紫外检测器(Waters 公司);色谱柱:Phenom enex C18 柱( 250mm×4.6mm, 5μm)(赵碧清等,“HPLC法测定湿疹喷雾剂中丹皮酚的含量”中草药,第36卷第3期2005年3月)
    ②Agilent 1100高效液相色谱系统;色谱柱:Diamondsil C18 (150mm×4.6mm,5μm)(湛文青等,“HPLC法测定徐长卿中丹皮酚的含量”,中药材第27卷第2期2004年2月)
    向阳等用RP-HPLC测定风湿定胶囊中丹皮酚的含量。采用HP-Agilent 1100型高效液相色谱仪;Hypersil2ODS色谱柱( 5μm, 4.6mm×250mm);流动相:甲醇- 2%冰醋酸溶液(63∶37);柱温室温;检测波长274nm。样品用甲醇超声处理。俞发测定徐长卿注射液中丹皮酚的含量时也采用同样的流动相系统和检测波长等。

    二、气相色谱-质谱联用法
    黄月纯用气相色谱-质谱联用法分析徐长卿不同药用部位挥发油的化学成分,并测定各成分的相对百分含量。采用岛津GCMS-QP5000 型气相色谱质谱联用仪。GC:DB- 1石英毛细管色谱柱(30m×0.25mm);进样口温度250℃,接口温度230℃;载气为氦气,流速为1.3ml/ min ;柱压为80kPa,分流比20∶1,进样量为1.0μl;升温程序:柱温60℃→280℃,速率为10℃/min。
    郭丽冰等用直接蒸馏-大孔树脂-气相色谱法,测定了徐长卿中丹皮酚含量。色谱条件:Hp-1710m×0.53mm I. D. 弹性交联石英毛细管柱,程序升温,分离检测,检测器FID,温度220 ℃,N2为载气,分流进样,分流比1∶5,在3~80ng内,线性相关系数r = 0.9997,平均加样回收率99.42%, RSD=2.28%。样品粉末经水蒸气蒸馏后,取蒸馏液上大孔树脂DA-201柱,用乙醇洗脱,定容后吸取0.5mL洗脱液,加0.5mL内标(正十七烷乙醇液),混匀后,取1μL进样。

    三、紫外分光光度法
    丹皮酚具有一定的挥发性,光谱法中样品处理一般都用水蒸气蒸馏或直接蒸馏法提取,以减少混入杂质, 通常蒸馏液稀释后于274nm 处测定吸收度。申庆亮等用紫外分光光度法测定徐长卿不同药用部位中丹皮酚的含量,测定波长为274nm。
      四、胶束荧光法
    庞志功等用胶束荧光法测定了牡丹皮和徐长卿中的丹皮酚含量。样品用1mol/ L的HCl2甲醇溶液浸泡1h 后,氯仿提取,提取液浓缩至干,用V (氯仿) ∶V (甲醇) = 1∶1 溶解定容,取20μL ,硅胶薄板点样,展开,刮取丹皮酚斑点,用φ= 95 %乙醇浸泡洗脱后,取适量,加2mL SDS 溶液(1.5%) 和水,快速混匀器上振荡5min ,再用水定容,于EX275nm , EM550nm 处测定荧光强度。

作者: 2007-6-29
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