赤丹胶囊为赤芍、丹参、三七、川芎诸药组成的复方
制剂，其中丹参为君药。丹参中的
丹参酮Ⅱ为其脂溶性成分。为有效进行产品质量控制，对方中丹参酮ⅡA含量进行定量研究。
1 仪器与试药
LC-10A型
高效液相色谱仪(日本岛津)。UV-3000紫外分光光度计。CSF-1A超声波发生器(上海超声波仪器厂)。赤丹胶囊(辽宁省计划生育科研院)。丹参酮ⅡA(中国药品生物制品检定所)。水为重蒸馏水，乙腈、甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2．1 色谱条件
色谱柱：Nucleosil-100 C18反相柱(4.6mm×200mm，5μm)，流动相：乙腈-甲醇-氯仿-水(42：40：1：18)(每1000ml加三乙胺2滴)，流速：lml/min，柱温：室温，检测波长：268nm，进样量：10μl。
2．2 对照品溶液的制备
取丹参酮ⅡA对照品约6.25mg，精密称定置50ml棕色量瓶中，甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀后精密量取8ml，置100ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度摇匀，作为对照品溶液。
2．3 供试品溶液的制备
精密称取胶囊内容物1.0g置50ml棕色量瓶中，加入甲醇25.00ml，精密称重，超声提取30min，放冷，补足重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，收集续滤液，经微孔滤膜过滤器(0.45μm)过滤，作为供试品溶液。
2．4 空白试验
按处方组成，取除丹参外的其余药味，按工艺要求制成缺丹参的阴性对照液。按上述色谱条件测定，结果在丹参酮ⅡA峰出现的位置上无对应峰出现，表明其它组分对测定无干扰。
2．5 标准曲线及线性范围
分别精密吸取对照品溶液4.0、8.0、12.0、16.0 20.0μl按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，丹参酮ⅡA进样量为横坐标，数据由计算机处理，回归方程为Y=3279835X一1647.6，r=0.9997。表明丹参酮ⅡA的进样量在O.04μg～0.2Oμg与峰面积成良好的线性关系。
2．6 精密度试验
精密吸取对照品溶液lOμl，连续进样6次，测定丹参酮ⅡA峰面积，其RSD为0.77％。
2．7 重复性试验
取同一批号的样品5份，按含量测定项下的方法测定，结果丹参酮ⅡA平均含量为O.253mg/g，RSD为1.6％。
2．8 稳定性试验
取供试品溶液，间隔lh进样一次，每次lOμl，结果丹参酮Ⅱ A峰面积平均为322564，RSD为2.3％。
2．9 加样回收率试验
精密称取胶囊内容物1.0g，分别加入丹丹参酮Ⅱ A对照品溶液一定量，按2．3项下方法制备加样回收供试液，并进行含量测定。
2．1O 样品测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，测定其中丹参酮Ⅱ A的色谱峰面积，以外标法计算丹参酮Ⅱ A的含量。结果3批赤丹胶囊中丹参酮Ⅱ A的含量分别为0.251、0.246、和0.258mg/g (n=3)。
3 讨论
丹参酮Ⅱ A受光照等因素影响易造成分解，应采用棕色瓶测定。本实验按以上色谱条件，每间隔一定时间，测定样品中丹参酮ⅡA含量。结果表明，样品测定应在8h内完成。由于丹参酮ⅡA的极性较小，本实验所用流动相系统加氯仿调节极性，加三乙胺防止峰拖尾。结果显示丹参酮Ⅱ A与其它色谱峰得到完全分离。用高效液相法测定赤丹胶囊中丹参酮Ⅱ A含量，经方法学考察和回收率试验，证明方法准确、灵敏、快速。可作为赤丹胶囊质量控制的指标之一。
参考文献：
[1] 中国药典[S]．一部，2000：57
[2] 李发美．医药高效液相色谱技术[M]．北京：人民卫生出版社，1999：574
作者：
2007-6-29