桑叶含量测定方法（芦丁）

    桑叶为桑科植物桑Marus alba L.的干燥叶。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定其芦丁的含量。
    2005版《中国药典》桑叶含量测定项下：
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A ，以0.5%磷酸溶液为流动相B；进行梯度洗脱。检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不得低于5000。
    0～5分钟：流动相A30%，流动相B70%
    5～10分钟：流动相A30→35%，流动相B70→65%
    10～15分钟：流动相A 35→40%，流动相B 65→60%
    15～18分钟：流动相A 40→50%，流动相B 60→50%
    供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约1g，精密称定，置圆底烧瓶中，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣再用甲醇50ml，同法提取2次，合并滤液。减压回收溶剂，残渣用甲醇溶解，转移至25ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。
    文献报道较多的是以芦丁为对照采用紫外分光光度法测定桑叶中的总黄酮的含量，以LC法测定芦丁含量的报道不多，如：孙莲等高效液相色谱法测定桑叶中的芦丁。采用HP1100 型高效液相色谱仪(美国惠普公司),DAD 二级管阵列紫外检测器。色谱柱为ZORBAX-ODS(5μm,125mm×4.6mm i. d.)；流动相为甲醇-水(含磷酸0.4%)( 45: 55)；检测波长为360nm；流速为0.6mL/min。桑叶药材用甲醇超声处理。
    孙莲等采用高效毛细管电泳法分离测定了新疆不同地区、不同采集期、不同品种的桑叶中的黄酮类成分芦丁、槲皮素的含量。P/ ACE MDQ 型高效毛细管电泳系统。以含体积分数为15 %甲醇的10mmol/ L磷酸二氢钠20mmol/ L 硼砂溶液( pH8.26)为电泳缓冲液,毛细管柱(57 cm(有效长度为50cm) ×75μm,美国),于25℃,20kV 恒压下进行电泳分离,在245nm波长处检测。毛细管柱使用前用0.10mol/ L的NaOH、水和电泳缓冲液分别冲洗1 min ,2 min 和3 min。每次电泳后,用电泳缓冲液冲洗毛细管柱2 min。采用压力进样方式,在25 ℃,20 kV 恒压下进行电泳分离,并在245 nm 波长处检测。药材用乙醚脱脂后甲醇超声处理。