高效液相色谱法测定佩尔地平注射液的含量

摘　要：目的：建立测定佩尔地平注射液中盐酸尼卡地平含量的方法。方法：采用高效液相色谱法；结果：盐酸尼卡地平在0～50 μg/ml浓度范围内线性良好，r=0.99999；五批佩尔地平注射液含量为94.84%～102.90%。结论：方法简单、准确、灵敏，可用于佩尔地平注射液生产和储存过程的质量控制及药代动力学研究。

　　盐酸尼卡地平(佩尔地平)属二氢吡啶类钙离子拮抗剂，为有效的血管扩张剂，可增加脑血管及冠脉血流量。已广泛应用于心血管疾病和严重高血压。临床疗效好且毒副反应少。现采用高效液相色谱法测定佩尔地平注射液的含量，结果较为满意。

1　实验部分

1.1　仪器与试剂
　　美国SP 8800泵；SP 200型紫外检测器；SP 4600型积分仪。盐酸尼卡地平对照品［(日本山之内制药株式会社)，用甲醇配成1 mg.ml-1标准溶液置冰箱中备用］；佩尔地平注射液(沈阳山之内制药有限公司分装)；甲醇(AR，东方化学试剂厂)；其它试剂均为分析纯。
1.2　方法与结果
1.2.1　色谱条件　RP-ODS(5μm)色谱柱(4.6mm×250mmid.)，流动相为甲醇-0.01mol.L-1 KH2PO4(80∶20)，检测波长为254 nm；0.1 AUFS；10μl环进样，纸速为0.5 cm.min-1。盐酸尼卡地平保留时间约8分钟.

1.2.2　标准曲线的制备　取标准贮备液，用甲醇配成不同浓度标准溶液，相当于盐酸尼卡地平浓度0、5、10、20、30、50 μg.ml-1，10 μl定量进样。回归方程为：Y=4242.65+29184.57C
r=0.9999。盐酸尼卡地平在0～50 μg.ml-1浓度范围内线性良好。
1.2.3　精密度试验　取盐酸尼卡地平标准贮备液适量，用甲醇配成10、20、50 μg.ml-1三种浓度，同一天内分别进样3次，每次10 μl，得日内RSD不大于1.11%；在3天中分别配制10、20、50 μg.ml-1三种浓度的标准溶液，分别测定，日间RSD不大于0.63%。盐酸尼卡地平最低检测浓度为0.11 μg.ml-1(R/N=3∶1)。
1.2.4　方法回收率　精取标准液适量，用甲醇稀释成浓度为10、20、50 μg.ml-1的溶液，按“1.2.2”项下方法测定，高、中、低浓度的平均回收率分别为(97.0±1.11)%、(104.0±0.61)%、(106.0±0.69)%。
1.2.5　佩尔地平注射液含量测定　取5批佩尔地平注射液各1支，分别精取100 μl，甲醇稀释，10 ml量瓶定容，进样10 μl，结果见表1。

Table 1　Assay of Perdifine injection

Batch No. Retention(time/min) Peak area Content/μg.ml-1 Assay/%
1 7.78 281038 9.4843 94.843
2 7.68 296198 10.203 102.03
3 7.71 302044 10.204 102.04
4 7.77 304559 10.291 102.91
5 7.94 297731 10.056 100.56

2　讨论
　　本文建立高效液相色谱法测定佩尔地平注射液的含量，方法简便、快速、准确，可用于佩尔地平注射液生产和储藏过程的质量控制。也可用于药代动力学研究。