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百令胶囊的氨基酸含量测定

来源:天津兰博实验仪器设备有限公司
摘要:【鉴别】(1)取本品内容物1g,加乙醇15ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取发酵虫草菌粉对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各5。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。...

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      本品为发酵虫草菌粉( C S -C-Q80 )制成的胶囊。
 
【性状】本品为胶囊剂,内容物为灰色至灰黄色粉末;气微腥,味微咸。

【鉴别】( 1 )取本品内容物 1g ,加乙醇 15ml ,超声处理 30 分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 1ml 使溶解,作为供试品溶液;另取发酵虫草菌粉对照药材 1g ,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(附录 Ⅵ B )试验,吸取上述两种溶液各 5?l ,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以石油醚( 60 ~ 90℃ )-甲酸乙酯-甲酸( 15:5:1 )的上层液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯( 365nm )下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(2) 在氨基酸含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液应具有与酪氨酸、赖氨酸、组氨酸和精氨酸对照品保留时间一致的色谱峰。 
(3) 精密称取发酵 虫草菌粉对照药材 0.50g ,同腺苷含量测定项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。另精密称取尿苷对照品,加 10% 甲醇溶液制成每 1ml 含 5?g 的溶液,作为对照品溶液。照高效液相色谱法(附录 Ⅵ D )试验,用十八烷基键合硅胶为填充剂, 以乙腈- 0.04mol/L 磷酸二氢钾溶液 为流动相,流速为每分钟 0.8ml ,梯度洗脱, 0 至 15 分钟,以 100% 的 0.04 mol/L 磷酸二氢钾溶液洗脱, 15 至 45 分钟,从 100% 呈线性降至 85% ,柱温为 25℃ ;检测波长为 260nm ,分别精密吸取腺苷含量测定项下供试品溶液和对照品溶液及上述两种对照溶液各 20?l ,注入液相色谱仪,测定。除溶剂峰外,供试品应呈现与对照药材 6 个最强峰保留时间一致的色谱峰,并应呈现与腺苷、尿苷对照品峰保留时间一致的色谱峰;以尿苷对照品为参照物,应在相对保留时间分别为 0.54(0.46 ~ 0.62) 和 1.17(1.02 ~ 1.37) 的位置处呈现特征峰。

色谱条件: Agilent 1100 系列高效液相色谱仪, Agilent Chemstation 色谱工作站;色谱柱为 Alltech Alltima C18( 250mm × 4.6mm , 5?m) ;积分事件: slope sensitivity:5 , peak width:0.01 , area reject:150 , height reject: 1 。

【检查】应符合胶囊剂项下有关的各项规定 (附录 ⅠL )。
 
【含量测定】氨基酸 取本品内容物约 20mg ,精密称定,置 180× 18mm 试管中,加 6mol/L 的盐酸溶液 6ml ,真空封管,放入 110℃ ( ± 1℃ )烘箱中,水解 24 小时。打开试管封口,把内容物移入蒸发皿中,试管用水 25ml 分次冲洗,洗液并入蒸发皿中,蒸干,残渣用 0.02mol/L 的盐酸溶液分次洗涤,合并洗涤液,滤过,滤液移至 50ml 量瓶中,用 0.02mol/L 的盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,用氨基酸自动分析仪测定。
      本品每粒含总氨基酸不得少于 60.0mg ( 0.2g 规格)或 150.0mg ( 0.5g 规格)。
      甘露醇 取本品内容物 1g ,精密称定,置 150ml 圆底烧瓶内,精密加入乙醇 100ml ,称定重量,加热回流 2 小时,放冷,用乙醇补足减失的重量,滤过,精密量取续滤液 5ml ,照甘露醇含量测定法(中国药典 2000 年版二部 89 页)自 “ 置碘瓶中 ” 起,依法测定。

      本品每粒含甘露醇( C 6 H 14 O 6 )不得少于 14.0mg ( 0.2g 规格)或 35.0mg ( 0.5g 规格)。

腺苷 照高效液相色谱法(附录 Ⅵ D )测定。

      色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈- 0.04mol/L 磷酸二氢钾溶液( 5 : 95 )为流动相;检测波长为 260nm 。理论板数按腺苷峰计算应不低于 3000 。
      对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥 24 小时后的腺苷对照品,加 0.5% 磷酸溶液制成每 1ml 含 12?g 的溶液,即得。
      供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,混匀,取 0.50g ,精密称定,置具塞锥形瓶中,加乙醚 20ml ,浸泡 30 分钟,滤过,弃去乙醚,残渣挥干乙醚,连同滤纸一并置具塞锥形瓶中,精密加入 0.5% 磷酸溶液 50ml ,称定重量,超声处理 30 分钟,放冷,称重,用 0.5% 磷酸溶液补足减失的重量,摇匀,静置,取上清液,用微孔滤膜( 0.45?m )滤过,取续滤液,即得。
      测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10?l ,注入液相色谱仪,测定,即得。
      本品每粒含腺苷( C 10 H 13 N 5 O 4 )不得少于 0.14mg ( 0.2g 规格)或 0.35mg ( 0.5g 规格)。
【功能与主治】 见 《 2005 年版药典》一部拟收载中成药品种规范前后功能主治对比表 。
【用法与用量】口服,一次 5 ~ 15 粒 ( 0.2g 规格) 或 2 ~ 6 粒 ( 0.5g 规格) ,一日 3 次。
【规格】每粒装( 1 ) 0.2g ( 2 ) 0.5g
【贮藏】密封。
【有效期】三年。  

作者: 2008-8-17
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