点击显示 收起
l注射用银黄冻干粉针分166．5、82．25、41．12mg／kg3个剂量组连续给大鼠注射35d，停药15d，结果各受试动物一般状况良好，外观、行为、排泄物等方面均未见异常变化。血常规检查结果表明，注射用银黄冻干粉针连续给药35d，雄性小剂量中性白细胞、恢复期中性白细胞及雌性中剂量血红蛋白、红细胞与对照组比较有差异，但在本实验室正常范围内波动，其它各项指标与对照组比较均未见差异。血液生化指标检查结果表明，注射用银黄冻干粉针连续给药35d，雄性大鼠大剂量。
T—BIL、中剂量cr及雌性大鼠中、大剂量ALT和中剂量Cr、大剂量TP与对照组比较有差异，恢复期雄性大鼠小剂量ALP、cr，中剂量T—BIL、ALB，大剂量ALT及雌性大鼠小、中剂量AIJP和中剂量ALB、TcH0、大剂量T—BIL与对照组比较有差异，但在本实验室正常范围内波动，其它各项指标与对照组比较未见差异。病理检查表明，主要脏器的组织形态学正常，未见与药物毒性相关的明显病变。提示本品注射给药对大鼠无长期毒性作用，说明按拟定的临床给药途径、剂量和疗程用药是安全的。
决明子是临床上常用的中药，有清肝明目、润肠通便和调节血脂等多种生物学功效。决明子富硒不仅提供了一种新的含硒补品，而且很可能提高决明子的药用范围和疗效，因此，准确测定富硒决明子中硒含量具有重要意义。目前，测定硒的方法报道较多，原子吸收分光光度法具有灵敏度高、需要样品量少、分析速度快、稳定性好等优点而被广泛用于微量元素的测定。
1实验材料
1．1试药
高氯酸、硝酸、硝酸镍(国产优级纯)；土温80(进口分析纯)；硒标准溶液(GSB04-1751-2004，北京有色金属研究总院)；超纯水。富硒决明子芽由本实验室自制。1．2仪器及工作条件
日立z一2000原子吸收分光光度计(日本日立公司)；恒温可调电热板；电热恒温水浴锅；通风橱；超纯水系统(美国Milipour公司)。检测波长：196．00nm；狭缝宽度：1．3nm；硒灯电流：12．5mA；背景矫正：塞曼；进样体积：20μL。温度控制：干燥，80～140℃，升温时间为40s；灰化：400℃；保温时间：20s；原子化：2500℃，保温时间：5s；清洗：2700℃，保温时间：4s。气体控制：原子化阶段氩气流速为30mL／min，其余时间的流速为200mL／min。2方法2．1样品的消化
用电子天平准确称取0．1g富硒决明子芽粉，置于50mL锥形瓶内，加入5mL混合酸(HNO3：HCIO=4：1)，并放置防爆玻璃珠3～5个，上端放一小玻璃漏斗，在通风橱中用恒温可调电热板130℃加热消化样品，待溶液呈无色为止，将消化好的样品溶液移入离心管中。由于硒在高温下易挥发，故在定容样品时加入1mg／mL硝酸镍100μL(基体改进剂)，最后用含0．1％的土温80的1％稀硝酸定容。2．2标准工作曲线的绘制
在已确定的最佳检测条件下，将硒标准溶液系列稀释(O、2．0、4．0、6．0、8．O、10．0、20．O、40．0、60．O、i00．0μg／L)，测定对应的吸光度值，绘制标准曲线。标准曲线方程：ABS=5．996134×10f+2．939666×10，r=0．9993，BL：0．1。2．3样品加标回收实验
准确称取样品，采用标准加入法，向其中加入10μg／L硒标准溶液，按样品测定方法，重复测定4次，回收率在90％～110％之间，符合测定要求。2．4方法的精密度和重现性
将消化好的样品溶液重复测定12次，其相对标准偏差均值为3．607％，表明该方法的精密度较高，重现性较好。
从表l、表2的数据可看出，本实验采用的消化条件和测定条件能够满足实验要求，精密度、准确度和重现性也较好，而且随着培养液中亚硒酸钠浓度升高，决明子芽中硒含量增加。但也有例外，如3号(培养液亚硒酸钠浓度为150mg／L)和6号(培养液亚硒酸钠浓度为300mg／L)；另外，随着培养液中亚硒酸钠浓度升高，决明子芽生长减弱，因此，在本实验条件下，培育富硒决明子芽的适宜亚硒酸钠浓度为250mg／L。
4讨论
4．1检测限和敏感率
波长196．00nm，敏感率为1．0；波长196．3nm，敏感率0．15。故本实验选择的检测波长为196．00nm；检出限是信噪比和信背比的函数，所以，检出限与背景信号浓度存在一定关系。本实验重复测定空白溶液10次，RSD均小于1％，表明仪器对空白溶液硒含量检出限是0．1pg／L。
4．2样品处理方法
在实验过程中，采用2种稀释和定容样品的方法。一种样品经混合酸消化后，直接用1％的硝酸稀释定容，测定结果偏低，误差达36．57％。主要原因是样品在灰化阶段大量挥发，而导致结果偏低。另一种是在样品定容液中加入基体改进棚酸镍和土温80后，灰化阶段挥发损失的硒大为减少，从而使测定的准确性提高。
4．3测定数据
测定结果：富硒决明子芽中硒含量见表2。样品1～8为笔者制备的8种不同含硒量的决明子芽。富硒决明子芽在制过程中，培养液中亚硒酸钠的浓度分别为50、100、150、200250、300、350、400mg／L，培养时间为72h。
5结语
笔者筛选了培育富硒决明子的适宜亚硒酸钠浓度和培时间，优化了石墨炉原子吸收分光光度法测定决明子中硒含量的介质，提高了测定的准确度，优化了原子分光光度法的测定条件。以标准硒溶液的系列稀释液建立的标准曲线为基准，测定了富硒决明子芽的含硒量，测定结果基本可靠。