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摘要：目的建立高效液相色谱法测定复方益母胶囊中阿魏酸含量的方法。方法采用ZORBAXSB—c，色谱柱，流动相为乙腈一0·2％磷酸水溶液(12：88)，检测波长为316nm，流速为1．0mL／min。结果阿魏酸在0．8～13ug／ml范围内呈良好的线性关系(r=0．99999，n=6)，平均回收率为103．0％(RsD=o．4％，n=5)。结论本法简单可行：准确度高，重现性好，回收率高，能有效控制复方
关键词：复方益母胶囊；阿魏酸；高效液相色谱法
中图分类号：R284．1文献标识码：A文章编号：1005-5304(2008)02-0048-03contentDetermination0fFerulicAcidincompoundPrescribeMotherwortHerbcapuslebyHPLClzHANGGuo,minI，QIChi-hongz，YANGGong-chang2，eta1rJ．KaifengInstitute，forFoodandDrugControlKaifengl475002，China：2．MedicalCollegeD，HenanProvince，Kaifeng475001，China)
Abstract：objecfiveToestblishaHPLCmethodforcontentdeterminationofferulicacidincompoundprescribeMotherwortHerbcapusle．MethodThecolumnZORBAXSB-C18wasusedwithAcetonitrite-0．2％iphosphoricacidaqueoussolution(12：88)asmobilephase，anddetectivewavelengthwas274nm，thelflowratewas1．0mL／min·ResultWithintherange0f0．8～13Pg，fel"ulicacidpresentedafinelinearrelationship(r=0．99999，n=6)．Theaveragerecoverywas103．0％(RSD=o．4％，n=5)．ConclusionthemethodiSsuitable，accuracyishighandreproduciblityisgood，recoveryishigh，andCancontrolthequal．．ityofcom—poundprescribeMotherwortHerbcapsule.
rulicacl…一PLCKeywords：compoundprescribeMotherwortHerbcaDsuieferuliccidHPLC.
复方益母胶囊是原益母冲剂(ws3一B～1812—94)的改进剂型，由益母草、当归、川芎、木香4味药组成，具有活血调经、行气止痛的功效，用于气滞血瘀、月经不调、痛经、产后瘀血腹痛的治疗。收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》，其中无含量测定方法。本品处方中含有当归与川芎，均含有阿魏酸，结合本品的功能主治及制法，故笔者确定以阿魏酸为检测指标，采用高效液相色谱法测定成品中阿魏酸的总含量。
1仪器与试药
Agilent1100高效液相色谱仪(在线脱气机、四元泵、自动进样器、柱温箱、VWD检测器)；MILLIPORESimplicity超纯水器；超声波清洗器(型号cX一250，功率250w，频率33kHz，北京医疗设备二厂)；电子天平[Metler-AE240型梅特勒一托利多(上海)有限公司]。
乙腈(色谱纯，批号031123，Fisher)，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。阿魏酸对照品(购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号773—9910)；复方益母草胶囊由开封市民康制药厂提供(批号040201，040202，040203，040204，040205．040206，040207，040208，040209，040210)。
2色谱条件
色谱柱：ZORBAXSB—c-s(5pm，4．6mm~250mm)；流动相：乙腈一O．2％磷酸水溶液(12：88)；检测波长：316nm；流速：1．OmLmin。刻度，制成阿魏酸对照品贮备液。
3．2提取方法的选择
取本品内容物(批号040201)约1．6g．2份．精密称定，密加入甲醇3011lL，称定重量，分别回流提取、超声处理胡_后，补足失重，滤过，取续滤液作为供试品溶液。分别吸取2种供试品溶液各20uL，注入液相色谱仪，按E述色谱奎法测定。结果表明，超声处理率最好，且该法操作简单．故采用超声方法提取。
3．3溶剂种类的选择
取本品内容物(批号040201)约1．6g，3份．精密称定，别精密加入50％甲醇、70％甲醇、甲醇各30mI。密塞．称定超声处理30min，取出，放冷，再称定重量。分别用相应溶剂取上述供试品溶液各20uL，注入液相色．谱仪．按上述色谱条件一依法测定。结果表明，以甲醇为溶剂。阿魏酸的提取效率好，故确定提取溶剂为70％甲醇。
取本品内容物(批号)约1．6份．精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇30ⅡlL，密塞．称定3．8线性系考察加入70%甲醇30ml，密塞，称定重量，群宇。供试品溶液的制备摇匀，滤过，取续滤液，即得。
h7空白试验
3.6供试品溶液的制备取本品内容物1．6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇30IfIL，密塞，称定重量，超声(功率250w，频率33kHz)处理45min，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
317空白试验
取益母草加水煎煮2次，第1次2h，第2次1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩成清膏；除当归、川芎外其余一味木香，用50％乙醇回流提取2h，滤过，滤液回收乙醇后与上述清膏合并，浓缩成稠膏状，加蔗糖及乙醇适量，制成颗粒，整粒，装胶囊，即得空白对照品，并按供试品溶液制备方法制得空白溶液。精密量取阿魏酸贮备液1IIlL，置50IIlL量瓶中，用10％乙醇稀释到刻度，制成对照品溶液。分别精密吸取上述2种溶液10¨L，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，结果见图1。试验结果表明，空白无干扰。
线性关系考察
精密称取阿魏酸对照品2．04mg，置i00mL量瓶中，加流动相超声溶解并稀释至刻度，摇匀，制成阿魏酸对照品贮备液。再精密量取贮备液适量，制成不同浓度的对照品溶液。分别精密吸取上述不同浓度的对照品溶液各20uL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录峰面积。以峰面积积分值为横坐标、阿魏酸进样浓度(mg／mL)为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程：j，(mg／mL)=0．00000141812+O．00000800509Z(，=0．99999，月=6)。结果表明，阿魏酸在0．8～13“g／fIlL范围内呈良好的线性关系。
3．9精密度试验
精密吸取上述对照品溶液(0．000408mg／mL)各20¨L，连续进样5次，记录峰面积，计算，RSD=O．27％。试验结果表明，仪器精密度良好。
3．1O稳定性试验
称取本品内容物1I632g，置三角瓶中，加70％甲醇30IIIL，超声处理45min，放冷，补重，滤过，分别于0、2、4、6、8h精密吸取续滤液20uL，注入液相色谱仪，依法测定，记录峰面积，计算峰面积的相对标准偏差。结果表明，供试品溶液在8h内稳定。
3．11重复性试验
按“3．6”项下供试品溶液的制备方法，分别称取同一批号、样品约1．6g，6份，依法操作，测定阿魏酸含量，计算相对标准偏差，结果平均含量为0．062mg／g，RSD=1．12％，表明重复性良好。
3．12样品测定
取10批中试样品，按“供试品溶液的制备”项下方法及色谱条件测定，结果见表1。
表1样品含量测定结果
称样量阿魏酸含量阿魏酸含量平均值RSD
批号(g)(rag／g)(mg／粒)(mg／粒)(％)
0402011．74520．0620．0217
0402021．6017O．067O．0235
1_6017O．0640．0224
0402031．68600．065O．0228
1．686O0．0640．0224
0402041．6210O．068O．0238
1．62100．067O．0235
0402051．6021O．0680．0238
1_6021O．066O．0231O．02292．51
0402061．60050．0640．0224
1．60050．064O．0224
0402071．570O0．065O．0228
1．570OO．066O．0231
0402081．6034O．0660．0231
1．6034O．066O．0231
0402091．621OO．065O．0228
1．621OO．0．68O．0238
0402101．602lO．066O．023l‘
1．6021O．0640．0224
根据以上10批含量测定结果，暂定本品每粒含当归和川芎总量以阿魏酸(C。棚。。0。)计，不少于18．3¨g。