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丹参妇康颗粒依据中医药理论，采用现代制剂技术制成的含有当归、丹参、赤芍、红花等5味药材的中药复方制剂，该方剂在治疗月经不调、痛经、闭经、产后淤血腹痛不孕等方面疗效显著。赤芍是本方主药，其主要成分为芍药苷，具有镇静、解痉、抗炎、抗凝血、抗血栓等多方面的作用。本实验采用反相高效液相色谱法(RP—HPLC)对该胶囊剂中的芍药苷测定方法进行了研究，结果表明，该方法简便可行，结果准确，其他成分无干扰。适用于该制剂的含量测定，能够有效控制丹参妇康胶囊的质量。
1 仪器与试药
1．1 仪器HPll00 HPLC，HPRev．A．05．01[273]色谱工作站，1314A—UV检测器，AE一200电子天平(瑞士)，KS一5000超声波清洗器(宁波)。
1．2 试药丹参妇康胶囊(040307)，芍药苷对照品(0736—200117中国药品生物制品检定所)，所用其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2．1 色谱条件色谱柱：Reliasil c18(5 txm，250 mm×4．6 inn)，保护柱：(5μm，12．50mm×4．6 mm)；流动相：乙腈一0．02 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(26：74)；检测波长230 nm；柱温30％；流速：1．0 m1．min-1；进样量10山；芍药苷保留时间为10 min左右。
2．2 供试品溶液的制备取中药颗粒约2 g，精密称定，置索式提取器中，加50 ml乙醇提取1 h，将乙醇挥干后，加流动相于残渣中并定量转移到25 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，用 O．45 μm微滤膜过滤，量取1 ml置于塑料离心管中，离心(8 000r／min，4 min)，取上清液，作为供试品溶液。
2．3 阴性对照液的测定取不含赤芍处方同法制备的阴性样品，按样品测定项下方法制备阴性溶液。
2．4芍药苷标准曲线的制备取干燥至恒重的芍药苷对照品约12 mg，精密称定，置100 ml棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得对照品储备液。精密吸取芍药苷对照品储备液0．04，0．12，0．36，1．2，2．4 ml，分别置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别吸取10μl，注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定峰面积，将进样浓度(X)与峰面积(y)进行回归处理，回归方程为： y=116 848．53X+592．90，r=0．999 5。实验表明，芍药苷对照品在0．496～29．76μg·ml。范围内具有良好的线性关系。
2．5 精密度实验精密吸取对照品溶液、同一供试液各10μl,重复进样5次，测定峰面积，计算相对标准偏差。结果对照品平均RSD为0．41％，供试品平均RSD为2．84％。
2．6重现性实验取样品适量粉碎，精密称取5份，每份1 g，按“2．2”项下制备供试液，上述色谱条件测定，结果：芍药苷含量的平均RSD为3．36％。
2．7稳定性实验取同一份芍药苷对照品溶液，分别室温放置不同时间测定，结果表明，样品至少在12 h内稳定。
2．8加样回收率的实验取本品(040307)5份各1 g，精密称定，置50 ml索式提取器中，加入芍药苷对照品，按“2．2”项下制备供试液，依法测定，结果芍药苷平均回收率：98．82％，RSD为2．11％(n=5)。
2．9方法可行性考察分别取芍药苷对照品溶液、样品溶液、阴性对照溶液，在上述色谱条件下测绘HPLC图谱，结果见图1。由图1可知，阴性样品溶液对测定无干扰，芍药苷与其他组分分离良好，方法可行。
2．10 样品的测定样品按2．2项下处理后，按上述色谱条件测定样品3批次，每批次取3个样品。精密吸取供试品液10μl，结果芍药苷平均含量为1.167mg·g-1
3 讨论
3．1 流动相选择在进行流动相的选择时，依据文献进行了大量的摸索实验，实验中发现甲醇一水体系色谱柱压较高，且芍荮苷理论塔板数低，保留时间长；选用乙腈一水一冰醋酸(16：84：0．8)为流动相时，柱效符合要求但芍药苷峰的保留时间较长约为16 min。而文中所确定的流动相则芍药苷峰的保留时间为lO min，柱效5 000以上，峰形较好，分离度大于1．5，因此我们选其为流动相。再者由于本品是一个由5味中药组成的复方制剂，在样品测定时，供试样品中含有一些极性小的物质不易从色谱柱上洗脱，若连续进样，易造成芍药苷位置附近有杂质干扰，影响其分离效果。因此在样品测定时，需要经常用乙腈对色谱柱进行冲洗，以除去弱极性物质，以保证样品的重现性和色谱的分离性能。
3．2 提取方法的选择分别用甲醇、乙醇、甲醇一水及乙醇一水作溶媒，选用加热回流提取、超声提取、索氏提取等方法进行摸索提取，实验结果提示，正文所示方法芍药苷提取较完全。
3．3 该方法简单、准确可行，可作为控制丹参妇康胶囊质量的方法之一控制制剂质量。