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来源：中国色谱技术网
关键词：心安颗粒；苦参碱；双波长飞点式薄层扫描法
心安颗粒为中药复方制剂，全方由6味中药组成。该制剂具有清热解毒，益气养阴，活血通阳的功效，临床主要用于治疗病毒性心肌炎所致的心悸、胸闷及心律失常等疾病。处方中苦参是君药，其主要有效成分是苦参碱、氧化苦参碱，具有水溶性，且苦参碱、氧化苦参碱是治疗快速性心律失常的主要有效成分。为此我们采用双波长飞点式薄层扫描仪对心安颗粒中苦参碱进行含量测定，作为控制心安颗粒的质量指标。
1、仪器与试药
CS-9301PC岛津双波长飞点式薄层扫描仪，定量点样毛细管2，5μL(DrummondScientificCo．)，高效硅胶G板(青岛、烟台)，标准层析缸(上海)，氯仿、苯、丙酮、醋酸乙酯及其他试剂均为分析纯，苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，805-200005)，心安颗粒(泸州医学院新药中试中心)。
2、试验条件
2．1薄层色谱条件展开剂为苯-丙酮-醋酸乙酯-浓氨试液(2：3：4：0.2)，显色方法：喷以碘化铋钾试液，再喷以少许5％亚硝酸钠溶液至斑点显色清晰。
2．2薄层扫描条件的选择将苦参碱对照品溶液与供试品溶液分别取5μL，分别点于同一硅胶G板上，以上述展开剂展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液，再喷以少量5％亚硝酸钠至斑点显色清晰，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，放置2h后，照薄层扫描色谱法进行扫描。
扫描方式双波长反射式锯齿形扫描，波长范围400～700nm，扫描速度：200mm/s，λR=650nm，λs=480nm，狭缝0.4mm×0.4mm，SX=3。
3、方法与结果
3．1对照品溶液的制备取经五氧化二磷减压干燥至恒重的苦参碱对照品精密称定10.42mg，加无水乙醇制成每毫升含1.042mg的溶液。用无水乙醇稀释为1.042，0.4168，0.2084，0.1042，0.04168mg/mL的溶液，每个浓度点样2μL绘制标准曲线(每个浓度同时点样2个点)。以点样质量(浓度×点样容积)为横坐标，峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程Y=4316.48X+101.58，r=0.9977(n=5)，苦参碱在0.08336～2.084μg范围内与峰面积值呈良好线性关系。
3．2供试品溶液的制备取心安颗粒约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入氯仿50mL，浓氨试液1mL，密塞，精密加入10mL0.2％盐酸，时时振摇，放置24h后，滤过，精密量取25mL滤液，置60℃水浴锅蒸发皿中蒸发干，用无水乙醇溶解，定容于5mL量瓶中，过滤，取滤液作为供试品溶液。
3．3阴性对照溶液将心安颗粒处方中各味药材(除苦参外)按制备工艺制备阴性样品并按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。经薄层层析、显色、扫描，结果表明阴性对照溶液在苦参碱位置无吸收，处方中其它药味对本测定无干扰
3．4稳定性试验精密吸取心安颗粒水煎⑦号样品溶液重复点6点于同一高效硅胶G板上，首尾分别点苦参碱对照品溶液0.04168，0.4168μg，按规定条件展开，显色固定，立即测定，室温下扫描13次，第1次扫描至第6次扫描间隔30min，以后每次扫描间隔30min，结果表明样品斑点峰面积值在4h内稳定，其RSD=3.503％。
3．5精密度试验精密吸取心安颗粒水煎⑦号样品溶液重复点6点于同一高效硅胶G板上，首尾分别点苦参碱对照品溶液0.04168，0.4168μg，按规定条件展开，显色固定，立即测定，室温下连续扫描5次，测得样品斑点峰面积值对展开显色后的第5斑点连续5次扫描测定，RSD=1.914％，说明仪器精密度较好。
3．6重复性试验取心安颗粒水煎⑦号干浸膏，每份约3g，5份，精密称定。按上述制备方法制备5份供试品溶液，按拟定的方法测定苦参碱含量百分率分别为0.02326，0.02328，0.02315，0.02209，0.02218，样品RSD=4.126％，本法重现性较好。
3．7回收率试验取心安颗粒水煎④号样品溶液，分别精密吸取5份，各10mL，分别加入苦参碱对照品溶液1mL(3.37mg/mL)。按拟定的含量测定方法提取、测定，结果平均回收率为104.63％。
3．8样品苦参碱含量测定取4批心安颗粒样品(20030128、20030208、20030218、20030228)，每批约3g，精密称定。按供试品溶液制备方法制备供试品溶液。吸取供试品溶液各5μL，苦参碱对照品溶液10.14μg，点于同一高效硅胶G板上，依法展开显色，进行扫描测定，计算样品中苦参碱的含量。
4、讨论
4．1苦参碱显色稳定性受气温影响较大，天气热时，苦参碱显色稳定性比天气冷时差，可能系显色剂碘化铋钾在天气热时碘易升华而导致显色稳定性差。
4．2通过对比试验发现，用大孔吸附树脂和～2o3处理过的样品溶液颜色浅，苦参碱的含量过低，背景干扰大，苦参碱峰形不好。未用大孔吸附树脂和2O处理的样品溶液颜色较深，苦参碱含量较高，背景干扰小，苦参碱峰形光滑，峰与峰分离很好。