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来源：中国色谱技术网
摘要：目的建立白芍总苷腔囊中芍药苷高效毛细管电泳的含量测定方法。方法测定条件，运行缓冲液50mmol/L硼砂缓冲液(DH10．6)；操作电压20kv；检测渡长230nm。结果测定芍药苷的线性范围为00625～1．0mg/ml，r=0.9995；白芍总苷腔囊加样回收率为99.07％。日内和日问精密度分别为1.61％和3．15％。测定的白芍总苷腔囊中，芍药苷的含量结果与HPLC一致。结论该分析方法简便、快速、准确。
关键词：高效毛细管电泳；白芍总苷腔囊；芍药苷
白芍总苷是由中药白芍中提取的有效成分，新近的研究表明，具有抗炎和免疫调节等药理作用，临床上用于类风湿性关节炎的治疗，效果良好。有文献报道，采用HPLC以白芍中所含芍药苷作为定量化学指标测定白芍总苷的含量．但未见对其制剂含量测定的方法报道。国外文献报道采用高效毛细管电泳法(HPCE)测定了白芍药材中芍药苷的含量，但未用于成药的定量我们采用HPCE法对白芍总苷胶囊中芍药苷的含量进行了测定，与HPLC法进行了比较，获得了令人满意的结果。
1、仪器和试剂
BioFocus3000型毛细管电泳仪(美国Bio-Rad公司)；融熔石英毛细管柱(未涂渍)50×50cm(有效分离长度45．5cm)；微孔滤膜(O．45μM)及过滤装置(Millipore，USA)；超纯水器(Milli-Qplus，USA)芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所)；白芍总苷胶囊(深圳南方制药厂，批号990417、99061199O906)甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2、方法和结果
2．1测定条件：运行缓冲液50mmol/L硼砂缓冲液，用氢氧化钠调DH为10．6。操作电压20kV，极性由正到负检测波长23Onm，柱温20℃。采用压力进样，压力进样常数为10psi×S。运行缓冲液和样品溶液均经0．45μm微孔滤膜滤过后使用
毛细管冲洗方法：每次开机用超纯水冲洗3min，0．1mol/L氢氧化钠3min，超纯水3min，运行缓冲液3min。每次测定之间用运行缓冲液冲洗lmin。
2．2对照品溶液的配制和测定：精密称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥36h的芍药苷100mg用甲醇定容成浓度为1．0mg/ml的对照品储备液。取储备液5005d于lml容量瓶中，加运行缓冲液至刻度，进样测定。
2．3供试品溶液的制备和测定：取白芍总苷胶囊内容物细粉0．3g，精密称定，置50ml容量瓶中，加入甲醇至刻度。超声处理(功率250W，频率18kHz)30min，滤过。滤液用运行缓冲液稀释至适当浓度进样。
2．4标准曲线制备：分别取芍药苷储备液62.5、125、250、500、1000，用超纯水定容至lml，依次进样后，以药物浓度(c)对峰面积与迁移时间之比值(x)进行回归，回归方程为：
C=-1．2765×10-2+2．7579×10-6X：r=0．9995，线性范围为0．13625～1．0mg/ml。
2．5精密度试验：取浓度为0．25mg/m1的对照品溶液，日内和日间重复进样5次，测定峰面积与迁移时间之比值，计算精密度，日内RSD为1．61％；日间RSD为3．15％。
2．6加样回收率试验：在已知浓度的白芍总苷胶囊样品溶液中，分别加入适当芍药苷对照品溶液进样分析，测定含量。
2．7样品含量测定：用本法对自芍总苷胶囊样品进行含量测定，并与HPLC法进行对比。
3、讨论
3．1缓冲液条件对芍药苷分离的影响：实验中考察了pH8～11范围的缓冲液，结果发现pH大于9．0时，芍药苷能够分离，且所得峰形较好；当pH小于9．0时，则芍药苷峰形变坏且迁移时间延长最后确定最佳pH为10．6，芍药苷得以很好分离，且峰形较好迁移时间适中。对硼砂浓度在25～100mmol/L。。的范围内进行了考察，结果发现，随着浓度的增加分离度增加，但同时电流增加造成基线不稳。兼顾二者关系，最后确定硼砂缓冲液浓度为50mmol/L。
32从本实验的分析结果可以看出，HPCE对白芍总苷胶囊样品中芍药苷的定量是准确有效的。HPCE较HPLC具有高效、快速、进样体积小、溶剂消耗少和抗污染能力强等特点。本实验中HPCE的理论板数可达到100000以上，分离效率大大高于HPLC。由方法学考察结果可见，本法精密度高、稳定性和重现性好。为白芍总苷胶囊中芍药苷的定量提供了一个新的途径。