毛细管电泳法测定山药中尿囊素的含量

　　                                                          来源：中国色谱技术网                

　　摘要：目的探讨毛细管电泳法测定山药中尿囊素含量的可行性。方法采用实验室组装的毛细管电泳仪，未涂层石英玻璃毛细管(65cm×75μm，有效长度50cm)，检测波长210nm，重力进样(10cm×5S)，运行电压15kV，温度20℃，背景电解质为30mmol／L硼砂溶液(pH9．4)。进样前以0．5mmol／LNaOH和背景电解质各冲洗3min。结果平均回收率为1O1．8RSD为2．4(=5)。结论毛细管电泳法用于山药中尿囊素含量的测定是可行的。

　　关键词：毛细管电泳；山药；尿囊素

　  山药为薯蓣科植物薯蓣DioscoreaoppositaThunb．的干燥块茎，具有补脾养胃、生津益肺、补肾涩精的功能，主治脾虚泄泻、食少浮肿、肺虚咳喘、消渴、肾虚尿频、遗精、带下等症[1]。尿囊素(allantoin)为山药的有效成分之一，具有角质松解、水合、麻醉镇痛、抗刺激物、促进上皮生长、消炎、抑菌等作用。尿囊素对于鱼鳞病、银屑病、多种角化性的皮肤病的治疗有一定效果，作为化妆品的一个成分也有着广泛的前途[2]。目前文献报道的尿囊素分析方法有比色法、紫外分光光度法、电位滴定法、光密度法L3]、高效液相色谱法L4等，毛细管电泳法测定山药中尿囊素的含量尚未见有报道。本研究用毛细管电泳法测定山药中尿囊素的含量，方法简便快捷，结果令人满意，为山药的质量控制提供了一种新方法。

　　1、仪器和药品

　　毛细管电泳仪为本实验室组装(VUV-22型紫外检测器，HV-30I高压电源一美国Unimicrotechnologies．Inc公司)；尿囊素对照品(山东省药品检验所提供，含量98．5～100．5%)；内标物为磷酸氯喹；硼砂为分析纯；水为重蒸水。山药购于沈阳中街天益堂(产地河南)，由沈阳药科大学生药学教研室孙启时教授鉴定。

　　2、电泳条件

　　毛细管柱：未涂层石英玻璃毛细管(河北永年光导纤维厂，65cm×75νm，有效长度50cm)；检测波长：210nm；重力进样：l0cm×5S，运行电压l5kV，温度20C；背景电解质：30mmol／L硼砂溶液(pH一9．4)，进样前以0．5mmol／LNaOH和背景电解质各冲洗3min。

　　3、方法与结果

　　3．1溶液的制备

　　3．1．1对照品溶液的制备：精密称取尿囊素35．66mg，加水至25mL作为对照品溶液。精密称取磷酸氯喹52．61mg，加水至25mL作为内标溶液。

　　3．1．2供试品溶液的制备：将山药样品粉碎后取粉末3g，加水约l5mL，超声波震荡提取20min，3000r／min离心5rain，取上清液于25mL量瓶中，沉淀用水洗2次，按以上条件离心，合并上清液加水至刻度。取该溶液2mL置5mL量瓶中，加入内标溶液1mL，加水至刻度作为山药供试品。

　　3．2线性关系的考察：精密量取对照品溶液0．1，0．2，0．4，0．6，0．8，1．0，2．0mL于5mL量瓶中。各加入内标溶液1mL，加水至刻度。以尿囊素与内标的峰面积比为纵坐标，浓度为横坐标进行回归分析，回归方程为Y=1．9983X+0．1l4(r=0．9994)，线性范围为28．5～570．6mg／L。

　　3．3精密度试验：山药供试品进样5次，RSD为2．4，表明分析结果的精密度良好。。

　　3．4样品的测定：取山药供试品，按所选条件进行测定，测得山药中尿囊素的含量为0．32，供试品及对照品电泳图见图1。

　　4、讨论

　　毛细管电泳法用于山药中尿囊素含量的测定，方法简便快捷，色谱条件无需优化即可对样品实现良好分离，分析结果的精密度和回收率均较好，与传统方法相比具有一定优势，可作为山药质量控制的一种方法。