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来源：中国色谱技术网
摘要：采用GC技术对烟叶中4个主要生物碱作了定量分析。提出了一种快速，简便，准确测定烟叶样品中生物碱的含量的气相色谱方法。极大地简化了烟叶样品的前处理过程，缩短了色谱分析时间。整个色谱分析时间只需5min．
关键词：气相色谱；烟叶；生物碱
尼古丁(Nicotine)、去甲基尼古丁(Nornicotine)、新烟碱(Anabasine)、去氢新烟碱(Anatabine)在烟草烘烤和加工过程中与亚硝酸盐作用生成相应的致癌化合物-亚硝胺化合物。因此为了对烟叶中的亚硝胺化合物含量降低做进一步研究，准确测定烟叶样品中的4个主要生物碱的含量显得至关重要。
气相色谱法测定烟叶样品中生物碱的原理是采用PE-17弹性石英毛细管柱作色谱床对内标物和样品中4个生物碱进行分离，通过氢火焰(FID)检测器检测其响应信号，采用内标标准曲线法定量，以求出4个生物碱的含量，并对相应的色谱条件和前处理方法进行了优化选择，分析结果表明此方法简便、快速，是一种确实可行的定量检测方法
1、实验部分
1．1仪器及工作条件
AutosystemXL型气相色谱仪(美国PE公司)和Tubrcehmm色谱工作站(美国PE公司)；FID检测器；M061-LF-517型自动进样器(美国PE公司)φ0.32mm，30mPE-17弹性石英毛细管柱，经优化选择的条件：载气He；柱前压276kPa(40PSI)；燃气H，压力0.2MPa：助燃气r压力0.3MPa；载气分流比60：1；气化室温度300℃；检测器温度320℃；进样量1.0μL；升温程序：初温120℃，以10℃／rain的速率升温到170℃。
1．2试剂尼古丁标样(ACRoS提供)；去甲基尼古丁，新烟碱，去氢新烟碱标样(美国肯塔基大学化学系提供)；喹啉(内标标样)(由FLUKA提供)；CH2C12(萃取溶剂)经纯化处理至进样无干扰峰：烟叶样品由云南省玉溪红塔烟草集团提供，
1．3萃取溶剂(含内标物喹啉)将喹啉40.0mg溶解在二氯甲烷中，定容为1L(浓度4μg／mL)
1．4标液的配制分别吸取6，4，2，1，0.5mL尼古丁标准液(100mg／mL)放人5个10mL带塞的
样品容器，各加人1mL萃取溶剂(含内标)，再用二氯甲烷定容为10mL，进行色谱分析。每个样品必须重复3次．相同方法配置另外3个生物碱的标准溶液．根据色谱结果作标准曲线分别计算4个生物碱的含量．
1．5样品处理取20O.0mg样品放人具塞试管中，加人1mL氢氧化钠水溶液(0.1mg/mL)，摇动试管使样品全部湿润．加人萃取溶剂(含内标物喹啉)10mL，塞上塞子，用振动机振摇60min过滤后．取滤液放人自动进样器样品瓶中进行气相色谱分析．
2、结果与讨论
经过对CH2Cl2，CHCl3和CHC13+苯(1：9)3组溶剂进行筛选．在10ml溶剂，振荡60min的相同条件下，回收率依次为82.37％，79.05％和81.34％，由此可见CH2Cl2的回收率最高．因此在本方法中最终采用CH2C12作萃取溶剂．此方法对4个生物碱的分析具有快速，准确和简便可行等特点，值得推广应用．