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来源：山东金普分析仪器有限公司
1、日常维护
1.1泵
泵是液相色谱仪的心脏，须精心维护和保养。处于良好工作状态的泵，其基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而平稳。要使泵具备良好的操作性能，应该保持泵系统的洁净。具体做法如下：
（1）要选择优质的溶剂和试剂，在进入仪器前用0.45um膜过滤，并进行脱气处理。
（2）泵开始使用时，一定要对其排气数分钟；使用完毕，要用流动相清洗泵和色谱柱约30分钟；如果使用了缓冲溶液，一定要用合适的流动相彻底清洗干净。
（3）定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈，并经常清洗进液处的微孔过滤头。
（4）改变流动相时，应避免沉淀产生，以防止泵堵塞。
1.2色谱柱
色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱应具有很高的塔板数，且仪器基线平稳。色谱柱比较娇气，在平时的工作中须注意以下事项：
（1）色谱柱不能够碰撞、弯曲或强烈震动；安装时，一定要保证阀件或管路的清洁。
（2）流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度流动相。
（3）在满足灵敏度的情况下，尽可能使用小进样量。如果样品比较“脏”，要进行净化或提纯处理。
（4）分析结束后，要清洗掉进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱。
（5）如色谱柱长期不用，应该用适当的有机溶剂保存并封闭或长期给柱子补充合适的流动相。
1.3检测器
对于紫外检测器，在分析前，柱平衡得差不多时，开启检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。
1.4进样器
分析结束后，应反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染或堵塞。
2、常见故障的分析与排除
即使日常精心维护的液相色谱仪，随着使用时间的增加或使用者经验的不足也会出现一些问题或故障。现将液相色谱仪容易出现的故障及解决办法介绍如下：
2.1保留时间变化
保留时间的变化有三种情况：波动、缩短、延长。
保留时间出现波动时，应检查柱温是否处于恒温状态，如果设置为室温，气温的变化会引起保留时间的波动，应该设置为恒定温度；等度和梯度间还没有充分达到平衡状态时，应该用十倍以上柱体积的流动相去平衡色谱柱；缓冲液浓度太低时，应换用>25mmol/L的缓冲液；色谱柱被污染或已接近柱寿命时，应更换保护柱或换新色谱柱。
保留时间缩短时，流速增加，应检查流速的设定；柱温高时，应检查柱温的设置；进样量太大时，减少样品用量或降低样品浓度；流动相的组成发生了改变，比如流动相中易挥发性有机相蒸发，两相之间互溶不好，会导致流动相不均匀或某一相出现部分沉淀；流动相的pH值应保持在3-7.5范围内，否则回引起柱键合相的流失。
保留时间延长时，流速减小，应检查流速的设定和管路是否有泄露；柱温低时，检查柱温的设置；流动相的组成发生了改变，比如流动相中易挥发有机相蒸发，两相之间互溶不好，会导致流动相不均匀或某一相出现部分沉淀；检查流动相的pH是否在3-7.5范围内，否则会引起柱键合相的流失。
2.2峰拖尾
色谱柱超载时，要减少进样量或稀释样品或使用高容量的色谱柱；色谱柱性能不佳时，更换色谱柱；死体积或柱外体积过大时，将连接点降至最低，并对所有连接点作合理的调整，尽可能采用细内径的连接；加入硅羟基，其作用是钝化色谱柱，增加缓冲液的浓度，降低流动相的pH值，钝化样品；出现峰干扰时，应清洁样品，调整流动相。
2.3峰展宽
进样体积过大时，用流动相配样；样品过载时，进小浓度、小体积样品；在进样阀中造成峰扩展时，进样前后排出气泡，以降低扩散；流动相粘度过高时，提高柱温，并采用低粘度流动相；等度洗脱，保留时间过长时，要增加流速或改用梯度洗脱；柱外体积过大时，将连接管径和连接管长度降至最小[1]。
2.4基线噪声
流动相或检测器中有气泡时，要对流动相进行脱气处理；检测器灯有连续噪声时，更换氘灯；出现由污染引起的随机噪声时，应清洗色谱柱、净化样品、使用HPLC级试剂；偶然有噪声时，可能是来自电源的干扰，如果电压不稳时，应采用稳压电源。
2.5肩峰或分叉
进样量太大或样品浓度过高时，要减少进样量或稀释样品；样品溶剂太强时，应使用软弱的样品溶剂；色谱柱性能欠佳时，应更换色谱柱。
2.6鬼峰
色谱柱未达到平衡时，要继续平衡色谱柱；样品中溶剂出峰时，使用流动相作样品的溶剂；出现进样阀余峰时，使用强溶剂清洗进样阀，并改进阀和样品的清洗程序；流动相用水不合格，应使用HPLC级的水。
3、使用注意事项
在使用混合溶剂作流动相时，一定要先混合，再过0.45um滤膜；等流动相恢复至室温，用超声波或He气进行脱气处理后，方可使用。
更换流动相时，必须按一定的程序进行，否则会产生问题。更换流动相有三种情况：互溶性流动相的更换、无互溶性流动相的更换和缓冲溶液的更换。对于第一种情况，先用准备更换的流动相把吸滤器完全清洗，再打开仪器的排液阀，按清洗键，清洗泵中的流动相。将吸滤器放入新流动相中，减慢流速清洗数分钟后关闭排液阀。接下来清洗色谱柱和检测器检测池直到基线平稳。对于第二种情况，先用与新旧流动相都互溶的中间清洗液（如：异丙醇）清洗，再用新流动相清洗，具体过程与第一种情况相同。对于第三种情况，应先用蒸馏水作为中间清洗液进行清洗，再用新流动相清洗即可。