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摘要目的：建立了高效液相色谱法测定氢溴酸樟柳碱的含量。
方法：采用ODS柱，以0.2%十烷基硫酸钠的甲醇-0.01mol.L-1磷酸二氢钾(用磷酸调节pH为3.5)(60∶40)为流动相,对羟基苯甲酸丁酯为内标物,用紫外检测器于210nm波长处检测。
结果：氢溴酸樟柳碱进样量在0.5～3μg范围内有良好线性关系(r=0.9999)。平均回收率为99.5%，RSD为2.6%（n=3）。最低检出量为0.006μg。
结论：本法快速、简便、准确。
Assay
of Anisodine Hydrobromide by HPLC Wang Yan
(Shanghai Institute for Drug Control，200233) AbstractObjective：To establish
HPLC method for the assay of anisodine hydrobromide.
Method:Using ODS column, a mixture of
0.2% sodium lauryl sulfate of methanol-0.01 mol.L-1
potassium dihydrogen phosphate (adjust with phosphoric acid to a
pH of 3.5)(60∶40) as mobile phase and butyl-p-hydroxybenzoate as internal
standard, wavelength of the detector was 210 nm.
Results:There is a good linear relationship
within the range of 0.5～3 μg (r=0.9999). The average recovery is 99.5%, RSD is 2.6
%(n=3) . The lowest limit of detection is 0.006 μg.
Conclusion:The method is rapid, simple and
accurate.
Key words HPLC, anisodine hydrobromide, butyl-p-hydroxybenzoate 氢溴酸樟柳碱为从茄科植物唐古特山莨菪［Anisodus
tanguticus (Maxim.) Pascher］根中提取得到的一种生物碱的氢溴酸盐,作为抗胆碱药，能解除血管痉挛，改善微循环。本品已收载在四川省药品标准，其中含量测定采用高氯酸非水滴定［1］，因本品中可能存在其它生物碱杂质,如氢溴酸山莨菪碱等,用上述滴定法测其含量时会把杂质一并计入含量，故本文参考文献［2］拟定了HPLC法测定氢溴酸樟柳碱含量,结果满意。 1 仪器与试药
岛津 LC-10AT 高效液相色谱仪, 岛津SPD-M10AVP二极管阵列检测器, 惠普HP
LaserJet-5L打印机。
氢溴酸樟柳碱对照品(批号为971009，纯度99.9%)、氢溴酸樟柳碱原料(批号为891001,
891002) 由解放军总医院科技开发中心提供；氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品、
对羟基苯甲酸丁酯为中国药品生物制品检定所对照品; 甲醇为色谱纯; 其余试剂均为分析纯。 2 色谱条件选择
2.1 色谱条件
采用Shim-pack CLC-ODS柱（5μm，6mm×250mm），以0.2%十二烷基硫酸钠的甲醇-0.01mol.L-1磷酸二氢钾(用磷酸调节pH为3.5)(60∶40)为流动相,流速为1.0mL.min-1,检测波长为210nm,进样量10μL。
2.2 系统适应性试验
2.2.1 检测波长选择
取氢溴酸樟柳碱、氢溴酸山莨菪碱、硫酸阿托品、 对羟基苯甲酸丁酯用甲醇溶解并稀释制成适当浓度,进样,分别选定254、215、210nm波长在二极管阵列检测器同时检测,根据各检测波长的峰形和响应值,
选得检测波长为210nm。
2.2.2 内标选择
为能用内标法准确测定本品含量，本文对咖啡因、盐酸伪麻黄碱、非那西丁、黄体酮、阿司匹林、氨茶碱、对羟基苯甲酸丁酯进行了测定，考察其与氢溴酸樟柳碱及其它生物碱的分离情况，结果表明对羟基苯甲酸丁酯的保留时间比较理想，且与其它峰没有干扰。
2.2.3 系统适应性测定
取检测波长选择项下试液,照上述色谱条件,进样10μL, 色谱图见图1。系统适应性试验结果为对羟基苯甲酸丁酯、氢溴酸樟柳碱、氢溴酸山莨菪碱、硫酸阿托品的保留时间分别为9.62、14.48、17.20、20.17min；理论板数对羟基苯甲酸丁酯和氢溴酸樟柳碱分别为12476、13639；拖尾因子分别为1.16、1.27；上述4种成分的分离度依次为11.5、5.1和5.2。 |
