点击显示 收起
摘 要:目的:建立高效液相色谱法分离和测定消炎利胆胶囊中脱水穿心莲内酯。 Determination
of Dehydroandrographolide Wang Yonglin Tao Ling Zhou Baozhu Li Yongjun Abstract:Objective:To develop
a HPLC method for the separation and determination of dehydroandrographolide
in Xiaoyanlidan capsules.Methods:Dehydroandrographolide was separated
on Shim-Pack CLC-ODS C18 column (5 μm, 150 mm×6 mm) and detected at
250nm, by using 0.01 mol.L-1
K2 HPO4-MeOH-THF(275∶200∶40)as mobile
phase. Results:The resolution was 1. The number
of theoretical plates calculated for dehydroandrographolide peak
was 4 600; the standard curve was linear in the concentration range
of 0.4~2.0 μg,r=0.999 8. The average recovery was 99.2%(RSD=2.50%).Conclusion:This method is accurate, rapid,
and simple for quantitative analysis of Xiaoyanlidan capsules. 消炎利胆胶囊系由穿心莲、苦木、溪黄草3味中药经提取加工制成的胶囊剂,具清热、祛湿、利胆的功效。临床用于肝胆湿热引起的口苦,胁痛和急性胆囊炎、胆管炎。穿心莲为本方的主药,为保证消炎利胆胶囊的临床疗效,有必要控制穿心莲药材的质量。曾有文献报道用高效液相色谱法[1]和薄层扫描法[2]测定与本品处方相同的莲胆消炎片中穿心莲内酯的含量,但制剂中脱水穿心莲内酯的含量测定方法未见报道。本试验研究了高效液相色谱法测定消炎利胆胶囊及药材中脱水穿心莲内酯含量测定方法。并对药材中脱水穿心莲内酯的含量测定与1995年版药典收载的薄层扫描法进行了比较。结果表明,该法操作简便、快速、重现性好,可用于消炎利胆胶囊的质量控制。 1 仪器与试药 岛津LC-6A高效液相色谱仪,SPD-6AV紫外-可见分光光度检测器,C-R6A色谱数据处理机。四氢呋喃(色谱纯)、磷酸二氢钾(分析纯)、脱水穿心莲内酯对照品(中国药品生物制品检定所提供)。 2 色谱条件 Shim-Pack CLC-ODS色谱柱(5 μm,150 mm×6 mm);流动相:0.01 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH至2.5)-甲醇-四氢呋喃(275∶200∶40),流速1 mL.min-1;柱温:35 ℃;检测波长250 nm;检测灵敏度:0.08 AUFS。 3 溶液配制 3.1 对照品溶液的配制 精密称取对照品20 mg,置100 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。 4 方法与结果 4.1 系统适用性试验 分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试液10 μL注入色谱仪,记录色谱图(图1)。理论塔板数以脱水穿心莲内酯峰计算为4 600,脱水穿心莲内酯峰与其他组分峰的分离度为1,脱水穿心莲内酯峰保留时间约14 min,阴性样品图谱在脱水穿心莲内酯峰位置处无假阳性峰,即本试验条件下脱水穿心莲内酯峰与其他组分分离完全。 |
图1 色谱图 4.2 线性关系考察 精密吸取脱水穿心莲内酯对照品溶液2,4,6,8,10
μL进样,记录色谱图,以峰面积A对质量W(μg)进行线性回归,回归方程为: 表1 样品含量测定结果(n=3) |
样品 | 批号 | 含量/g.g-1 | RSD/% |
消炎利胆胶囊 | 980325 | 2.47 | 0.47 |
980328 | 2.42 | 0.82 | |
980406 | 2.59 | 0.33 | |
消炎利胆片 | 971212 | 0.82 | 0.84 |
980530 | 0.91 | 1.37 |
5.1 穿心莲主要含穿心莲内酯(Andrographolide)、脱水穿心莲内酯(14-Deoxy-11,12-didehydro-andrographolide)、新穿心莲内酯(Neoandrographolide)等成分[3]。试验中我们收集了不同产地的穿心莲药材,并对药材中脱水穿心莲内酯的含量测定方法进行了研究,除超声时间增加为60 min外,测定方法与制剂测定方法相同。用本法测定的5批药材的结果与1995年版中国药典收载的薄层扫描法测定结果进行比较(见表2),结果表明,2种方法测定的结果差异不大。而不同批号药材的测定结果差异较大,鉴于大生产中的原料受产地、来源、品种等因素的影响,使制剂测定结果产生较大的差异,故对穿心莲药材中脱水穿心莲内酯的含量应作限度规定。 表2 穿心莲药材含量测定结果(%,n=3) |
药材编号 | 高效液相色谱法 | 薄层扫描法 |
1 | 0.916 | 0.923 |
2 | 0.770 | 0.781 |
3 | 0.465 | 0.448 |
4 | 0.453 | 0.451 |
5 | 0.937 | 0.923 |
作者单位:王永林(贵阳医学院药学系 贵阳 550004) 参考文献: [1]郭世民. RP-HPLC法测定消炎利胆片中穿心莲内酯的含量.湖南中医药导报,
1997,3 (4):42 收稿日期:1998-12-15 |