高效液相色谱法测定栀子中藏红花素的含量

　　　　　　　　(山西省药品检验所 030001)
　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　(中国药品生物制品检定所 100050)

摘　要　采用高效液相色谱法测定了山栀子、水栀子中主要色素成分藏红
花素的含量，并对色谱峰纯度、色谱峰光谱一致性进行了比较。
关键词：藏红花素  山栀子  水栀子   高效液相色谱法
   
藏红花素(Crocin)是西红花、栀子中共有的色素类成分。以藏红花素为
主要成分的栀子黄色素已广泛用于食品添加剂，国家食品添加剂标准中以色
价作为质量评价和控制指标^［1］。另据报道，藏红花素具有明显的降血脂作
用，并已有以此开发新药的尝试。栀子资源丰富，作为提取藏红花素的原料
是很有价值的。本文报道高效液相色谱法测定藏红花素的方法，并比较了西
红花、山栀子、水栀子及栀子果皮、果仁(种子团)中藏红花素的含量情况，
可供有关研究参考。

1  仪器与试药

高效液相色谱仪：SP—8800泵；SP—200紫外检测器；SP—4400积分仪；
岛津SPD—M10A二极管阵列检测器；CLASS—10A色谱工作站。

试剂：甲醇(分析纯)。

样品：室存山栀子、水栀子样品，市售西红花样品。

对照品：藏红花素(南京药科大学周素娣教授提供)。

2  测定条件及方法

2.1  色谱条件  色谱柱：Nucleosil C₁₈，5μm，4.6mm×220mm；流动相：甲
醇—水(53∶47)；检测波长：440nm；流速：0.7mL/min。此条件下的色谱分
离结果见图1。

2.2  样品制备  取样品细粉0.2g，精密称定，准确加入流动相溶液20mL，称
定重量，水浴加热回流30min，放冷，补足失重，用0.5μm微孔滤膜过滤，即得。

图1 色谱分离结果

1.藏红花素对照 2.山栀子 3.水栀子 4.西红花

3  方法学考察

3.1  色谱峰纯度检测   应用二极管阵列检测器对样品中藏红花素色谱峰进行
纯度分析，纯度系数为0.9943，表明色谱分离良好。

3.2  色谱峰光谱一致性比较   藏红花素色谱峰与样品中相应色谱峰在200～
600nm进行光谱比较，均在440及465nm处有最大吸收(见图2)，表明样品色
谱峰与对照品色谱峰一致。

图2 栀子及西红花药材中藏红花素色谱峰光谱一致性比较

1.藏红花素对照 2.山栀子中藏红花素

3.水栀子中藏红花素 4.西红花中藏红花素

3.3  线性关系考察   精密称定藏红花素对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.13mg
的溶液，作为对照品溶液。精确吸取对照品溶液2、4、6、8、10μL分别注入
色谱仪，按色谱条件测得峰面积积分值，以进样量为横坐标，峰面积积分值
为纵坐标，线性回归方程：
Y＝3206.8+13587.1X  r＝0.9999

3.4  精密度试验  同一样品，相同体积，重复进样6次，峰面积积分值的RSD＝1.00％。

3.5  重复性试验  同一批样品，按样品制备方法平行制备5份，依法测定，
含量平均值的RSD＝1.49％。

3.6  回收率试验   分别称取已测知含量的样品一定量，精密加入藏红花素对
照品溶液适量(加入量0.120mg)，按样品测定方法制备供试液，依法测定，测
得回收率平均值98.54％，RSD＝2.20％，n＝4。

4  样品测定

分别取山栀子、水栀子、山栀子果皮、种子团及西红花样品，依法测定
含量，结果见表1。

表1 样品中藏红花素含量测定结果(n=4)

5  讨论

5.1  曾试验了超声30min、加热回流30min、60min提取样品，结果回流30min
处理测定量最高，因此选定作为样品提取方法。

5.2   测定结果表明西红花中藏红花素含量最高，水栀子次之，山栀子较低。
从资源利用角度考虑，水栀子因栽培广泛，产量较大，是提取藏红花素的理
想原料。

5.3   不同产地的山栀子藏红花素含量差异较明显，是否与产地加工方法有关，
有待探讨。种子团中藏红花素含量高于果皮，与文献报道一致。

参考文献

1 中华人民共和国国家标准.食品添加剂栀子黄.GB7912—87

2 神藏美枝子等.クチナシ果から抽出されゐ黄色天然色素の品及び市
品の—主として高速液体クロマトグラフイによゐ分析.食志，19
85，26(2)：150

HPLC Determination of the Content of Crocin

Wang Chunfang

(Shanxi Province Institute of Drug Control,030001)Lu Jing

(National Institute for the Control of Pharm.& Bio.Products,100050)

Abstract:This article reports the determination method of the content of crocin in Fructus
Gardeniae and Stigama Croci by high performance liquid chromatography,the peak purity
and spectrum similarity were tested further.
Key words:crocin,Fructus Gardeniae,Stigama Croci,HPLC