HPLC法测定止血消炎散中大黄素的含量

摘　要：目的：建立HPLC法测定止血消炎散中大黄素的含量。方法：固定相：RP-C₁₈柱，流动相：甲醇－水－冰醋酸（80∶20∶1)，检测波长254nm。结果：大黄素浓度在25～250μg^.m1^-1范围内，线性关系良好，r=0.9999。平均回收率99.84％，RSD=1.02％。结论：本法可用于止血消炎散制剂中大黄素的质量控制。
关键词：HPLC法；止血消炎散；大黄素
中图分类号：R927.2　文献标识码：A
文章编号：1008-9926(2000)01-0042-02

HPLC Determination of Emodin in Zhixuexiaoyan powder

LIU Jin-Hua　LU Xu-Wen　LI Dong-Mei
（The 251st Hospital of PLA,zhangjiakou　075000,Hebei）

ABSTRACT：Aim To establish a HPLC method for the determination of emodin in zhixuexiaoyan power.Methods The mobile phase cons isted of methanol-water-glacial acetic acid(80:20:1).Detective wave was 254nm. Results The good linearity was from 25 to 250μg^.m1^-1,r =0.999 9.The average recovery was 99.84% with RSD=1.02%.Conclusio n The method can be used in the detemination of emodin in zhixuexiaoyan power.
KEY WORDS：HPLC；Zhixuexiaoyan power;Emodin

　　止血消炎散是以大黄为主要成分的中药制剂,具有抗炎、止血、镇 痛、收敛作用^［1、2］。对大黄中大黄素的含量测定，目前，国内外多采用薄层扫描法和高效液相色谱法。本文建立了反相HPLC法，无需预处理即可直接测定大黄素的含量，方法简便、准确性高，为该制剂中大黄素的质量控制提供了方法。

1　仪器与材料

　　高效液相色谱仪，pu-980泵，uv-975检测器，Rheodyne 7725iJIN进样阀，CK色谱工作站（日本Jasoc公司）。大黄素对照品（中国药品生物制品检定所），止血消炎散（北京军区张家口制剂中心，批号980201）；甲醇（sp），冰醋酸（AR），水（重蒸镏水）。

2　方法与结果

2.1　色谱条件　不锈钢色谱柱Techsphere ODS(5μ),250×4.6mm，带有保护柱12×4.6mm；流动相：甲醇－水－冰醋酸（80∶20∶1）；检测波长：254nm；流速：1.0ml/min；灵敏度：0.01AUFS；柱温：室温；进样量：20μl。
2.2　大黄素色谱图　依上述色谱条件，测得大黄素对照品溶液和供试品提取液色谱图，均在保留时间(t_R)10.883附近出现单一大黄素吸收峰；空白供试品提取液在t_R10.88附近不出现任何峰。见图1。

图1　HPLC法测定大黄素含量色谱图
A 空白样品　B 大黄素对照品　C 止血消炎散

2.3　标准曲线绘制　精密称取经五氧化二磷干燥24h的大黄素对照品12.5mg置25ml量瓶中，加甲醇溶解并定容。经0.45μm滤膜滤过。取续滤液用甲醇配制成浓度分别为25、50、100、150、200、250μg^.ml^-1的对照品溶液，分别进样。按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积对浓度进行线性回归，得回归方程为：

y＝-81 134.76＋59 753.99c，r＝0.999 9，n＝6

　　表明大黄素含量在25～250μg^.ml^-1范围内，呈良好的线性关系。
2.4　精密度实验　精密量取上述50、100、150μg^.ml^-1浓度的对照品溶液，依上述色谱条件，每份重复进样5次，大黄素峰面积积分值的RSD分别为1.53％；2.23％；1.78％。
2.5　重现性实验　精密量取同一批号供试样品提取液5份，依上述色谱条件测定，大黄素含量的RSD为1.99％。
2.6　回收率试验　精密称取已知含量的止血消炎散样品5份，每份约1.25g，置25ml量瓶中。分别精密加入大黄素对照品溶液5ml，加稀盐酸2ml，加甲醇至刻度。超声振荡提取1h，滤过。滤液再经0.45um滤膜滤过后，依上述色谱条件测定。结果大黄素平均回收率为99.84％，RSD为1.02％。
2.7　样品含量测定　精密称取供试样品约2.5g，置具塞量瓶中，加稀盐酸3ml，精密加入甲醇20ml，精密称定。超声振荡提取1h，以甲醇补足失去的重量，滤过。滤液再经0.45μm滤膜滤过，直接进样测定并计算含量，结果见表1。

表1　止血消炎散样品中大黄素含量测定结果

样　品

批　号

含量（％；g/g）

(%)

RSD（％）

止血消炎散

971125

0.2820

980129

0.2796

980214

0.2847

0.2819

0.198

980325

0.2827

980406

0.2805

3　讨　论

3.1　大黄素的提取，我们先后试用了索氏回流提取、甲醇24h浸泡、盐酸－甲醇(3:20)超声振荡提取等方法，发现后一种方法操作简便，节省溶剂，且提取效果好。
3.2　采用RP-HPLC法测定止血消炎散中大黄素的含量，方法准确可靠，回收率与重现性均符合要求，可作为止血消炎散的质量控制方法。

(本文编辑　刘贺之)

作者简介：刘晋华，女，1954年10月生。副主任药师。中国药学会河北分会会员，北京军区
药学专业委员会委员。
作者单位：刘晋华（中国人民解放军第251医院　河北　张家口　075000）
路绪文（中国人民解放军第251医院　河北　张家口　075000）
李冬梅（中国人民解放军第251医院　河北　张家口　075000）

参考文献：

［1］　阴健、郭力弓．中药现代研究与临床应用［M］.第1版，北京：中国古籍出版社，1994;66
［2］　江苏新医学院.中药大辞典［M］.第1版，上海：上海人民出版社，1977;102

收稿日期：1999-06-05
修回日期：2000-01-08