高效液相色谱法测定鼻炎滴剂中盐酸麻黄碱的含量

广东省佛山市制药二厂　528000

　　鼻炎滴剂是中药复方溶液制剂，主要成分为盐酸麻黄碱、金银花提取液、辛夷油、冰片等，用于治疗慢性单纯性鼻炎，其中盐酸麻黄碱虽占量不大(5 %)，但对疗效影响较大，且为限量用药，因此测定其含量意义很大。由于多种原因所致,本品现行标准还没有盐酸麻黄碱的含量测定项目，虽然文献^［1～3］中有报道盐酸麻黄碱的测定方法,但都不适合本品的测定。本品曾试用过气相色谱法测定含量,结果不理想,现运用液相色谱外标法直接测定盐酸麻黄碱的含量，获得满意的效果。
1　样品及试剂
样品由本厂提供；阴性样品按处方在实验室自行制备；盐酸麻黄碱对照品采用制剂用原料(含量99.7 %)，液相色谱图为单峰,见图1-A;乙腈为色谱纯试剂；流动相用水为双蒸水；其它试剂均为分析纯。
2　仪器及色谱条件
2.1　仪器　Waters 810工作系统；Waters 501泵；Waters 486紫外检测器；Waters U6K手动进样器。
2.2　色谱条件　色谱柱：Waters Nova-Pak C₁₈，3.9 mm×150 mm；流动相：醋酸-醋酸铵缓冲液(pH4.5)-乙腈(9∶1);流速:1.0 mL/min；检测波长：257 nm；灵敏度：2.0AUFS；进样量：15 μL。在此条件下测得的样品色谱图见图1-B,有很好的分离效果,分离度大于1.5。
3　方法及结果
3.1　标准液的配制　精密称取适量的盐酸麻黄碱对照品，用流动相配成浓度为1.0 mg/mL的溶液。
3.2　标准曲线　分别吸取标准液11、13、15、17、19 μL在规定的色谱条件下进样，以对照品的量(μg)为纵坐标，色谱峰面积为横坐标，得一条直线，回归方程(n=5)为：
Y=-0.5722536+2.184228×10^-5X　r=0.9997
3.3　样品测定方法　精密吸取样品5 mL于10 mL离心管中，加入6 mol/L盐酸5滴，振摇，离心,转速2500 r/min，倾出上清液于蒸发皿中，沉淀用0.01 mol/L盐酸洗涤，离心2次，每次5 mL，合并上清液于蒸发皿中，水浴蒸干。残渣加入石油醚(60～90℃)超声处理2次，每次15 mL，超声振荡2～3 min,弃去石油醚液,并在水浴上挥干石油醚，残渣用70 %乙醇溶解，溶液置于25 mL容量瓶中，用少许70 %乙醇洗涤蒸发皿2次，合并洗涤液于容量瓶中，用70 %乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液做供试液。在规定的色谱条件下，分别吸取标准液及供试液各15 μL进样，结果用峰面积外标法计算，按标示量(5 mg/mL)的百分率表示含量。
3.4　阴性样品的试验　按处方工艺要求(除盐酸麻黄碱不加入外)，在实验室自行配制阴性样品，按测定方法试验，色谱图见图1-C，由色谱图可知,杂质对色谱峰无干扰。

图1　色谱图
A.对照品　B.样品　C.阴性样品

3.5　回收试验　于已测定的样品中，准确加入盐酸麻黄碱对照品10 mg，按实验方法操作,测定7份样品,平均回收率为100.6 %,RSD为0.64 %(n=7)。
3.6　重现性试验　同一批样品测定7份平行样，平均结果98.6 %，RSD=0.52 %(n=7)。
3.7　实验结果　按规定实验方法测得7批样品,含量分别为103.6 %,101.2 %,98.6 %,97.5 %,102.3 %,103.2 %,99.5 %。
4　讨论
4.1　在选择流动相过程中，曾试用过甲醇-水；甲醇-0.5 %磷酸二氢钾；乙腈-0.5 %磷酸二氢钾；甲醇-0.1 %磷酸二氢钾；甲醇-2 %醋酸铵(用醋酸调pH 4.0)；乙腈-2 %醋酸铵(用醋酸调pH 4.0)等多种系列不同配比的流动相系统，最后选择醋酸-醋酸铵缓冲液(pH 4.5)—乙腈(9∶1)，在此中选用乙腈而不用甲醇是由于乙腈不但能改善色谱峰形状，增加对称性，而且还能降低柱压。
4.2　样品前处理过程中，采用蒸干溶液后进行有机溶剂超声处理油溶性杂质成分，而不采用经典且常用的有机溶剂萃取提纯法处理杂质，是由于制剂中含有大量的乳化剂、防腐剂类的物质,它们会直接影响到萃取难度和效果。

参考文献
1　胡家炽等.用HPLC法同时测定息喘灵片中茶碱、盐酸麻黄素和异戊巴比妥的含量.药物分析杂志,1990,10(2):97
2　金智珠等.麻黄及中成药中麻黄碱的气相色谱测定法.药物分析杂志,1987,7(3):174
3　徐俊保.制剂中盐酸麻黄碱的快速测定法.药物分析杂志,1983,3(6):362

(本文于1997年10月22日收到)