反相高效液相色谱法测定藿贞胶囊中红景天苷的含量*

　　藿贞胶囊由丹参、女贞子、淫羊藿等中药组成。红景天苷是女贞子活性成分中的水溶性组分^［1］。为控制产品质量我们用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对3个批号藿贞胶囊中的红景天苷进行了含量测定，分析结果如下。

1　材料和仪器

　　藿贞胶囊(批号970601，971101，980611)。红景天苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号818-9401)；甲醇(浙江黄岩化工实验厂，批号950321)为色谱纯；氯仿(北京化学试剂公司，批号941101)；双重蒸馏水。HPLC仪：Waters model 510泵，Waters 484型紫外检测器，SP 4290微处理机。

2　方法和结果

2.1　色谱条件　C₁₈(5 μm) 150 mm×4.6 mm不锈钢色谱柱；流动相为甲醇-水(10∶90)，流速1.6 ml^.min^-1；紫外检测波长276 nm^［2］；柱温30 ℃；纸速，0.1 cm^.min^-1；进样量10 μl。
2.2　标准曲线的绘制　精密称取干燥至恒重的红景天苷化学对照品11.4 mg，用甲醇定容至50 ml，摇匀后备用(母液)。精密量取1 ml母液后再用甲醇依次对半稀释，使浓度分别为228，114，57，29，15，7，4 mg^.L^-1的对照液，各进样10 μl，以峰面积积分值A为纵坐标，进样量m为横坐标，做标准曲线得回归方程A=205252.838m-9987.701 (r=0.9994)，进样量在40～2280 ng内线性关系较好，最低检测浓度为2 mg^.L^-1。
2.3　样品测定　取藿贞胶囊20粒，除去胶囊外壳，烘干(胶囊内容物平均重0.40 g，每粒相当于5 g生药)。将烘干物研成细粉，80 ℃烘至恒重。精密称取该粉末1.000 g装入滤纸桶中，加氯仿180 ml于索氏提取器中回流提取，时间为2 h。弃去氯仿提取液，再用甲醇-水(7∶3) 180 ml提取一次，时间为2 h^［1］。回收提取液至干后，再用70%甲醇定容到10 ml量瓶中，过滤后为样品测试液。进样10 μl，色谱图见图1，根据所测峰面积积分值，用外标两点法计算样品中红景天苷含量，按上法对3个批号的胶囊进行了测定。结果见表1。

表1　样品中红景天苷的测定结果.n=5

图1　红景天苷色谱图
A-对照品；B-样品

2.4　加样回收率试验　分别精密称取批号为971101样品1.000 g共5份，各精密加入对照品5.0 mg。按样品测定项下的步骤提取。结果显示，平均加样回收率为96.3%(n=5)，RSD为2.4%。
2.5　精密度试验　选标准曲线用的中浓度溶液，按上述色谱条件分析，每隔0.5 h进样一次共6次，RSD为2.9%。
2.6　稳定性试验　吸取批号为971101保留在量瓶中样品10 μl，每6 h测定一次，发现红景天苷48 h内稳定，RSD为3.4%。

3　讨　论

3.1　在提取分离过程中曾用了甲醇直接回流提取和将甲醇直接加入样品组中超声波提取，经样品测试后发现上述方法分离效果不够理想。在提取样品中经过三种方法的比较，认为本法提取效果最好，样品经氯仿先提取可使藿贞胶囊中脂溶性齐墩果酸与水溶性部分红景天苷分离，再经过70%甲醇提取后使红景天苷得到很好的分离，故采用本法。
3.2　本法分离效果好，准确度高，重现性好，可为藿贞胶囊在生产中的质量控制提供方法依据。■

基金项目：“九五”国家重点医学科技攻关项目，96-06-05-04
作者单位：张立海(北京　卫生部北京医院药剂科　100730)
宋友华(北京　卫生部北京医院药剂科　100730)
孙春华(北京　卫生部北京医院药剂科　100730)
任百健(北京　卫生部北京医院药剂科　100730)
傅得兴(北京　卫生部北京医院药剂科　100730)

参考文献：

［1］石力夫，蔡溱，石广通.不同产地女贞子中不溶性活性成分及齐墩果酸的反相高效液相色谱分析.中国药学杂志，1998，23(2)：77.
［2］陈发奎主编.常用中草药有效成分及含量测定.北京：人民卫生出版社，1997：278.